生物ppt课件3免疫球蛋白基因和基因工程抗体.ppt

第一节 免疫球蛋白的概念;抗原刺激B细胞后分化增殖为浆细胞合成和分泌的, 能与抗原发生特异性结合并具有多种免疫功能的球蛋白。;2、免疫球蛋白 (immunoglobulin，Ig); ;第二节 免疫球蛋白的结构;一、基本结构;(一)重链（heavy chain); ;重链的功能区之二:恒定区; ;绞链区的作用;(二) 轻链;二、酶解片断;单体绞链区，水解产物为 2个Fab片段及一个Fc片段。 Fab片段(抗原结合片段):含有一条完整的轻链及重链的一部分，能与相应抗原特异结合，但是单价性的（只能结合抗原，不能凝集或沉淀）。 Fc片段(可结晶片段):不能与抗原结合，但具有多种生物学活性，结合补体、固定细胞、通过胎盘等。 ;2. 胃蛋白酶;三 免疫球蛋白的血清型;（一）、同种型;1、 类与亚类;2、 型及亚型;（二）、同种异型;（三）、独特型; ;一、Ig M;二、Ig A;三、Ig G、IgD、IgE;五、Ig的功能;第三节 免疫球蛋白（Ig）基因及基因重排;一、免疫球蛋白基因的结构特点 由?、?和重链三组基因群控制。基因群中含有许多基因节段(segment)。;2.在胚系B细胞和其它有核体细胞的染色体中，编码Ig V区和Ig C区各个部分的基因节段相互分离。;B细胞在分化成熟的过程中，从重链(H)或轻链(?、?)基因群的基因节段库中各选择出一个节段，重新排列，形成功能性的Ig基因单位，重排的Ig基因经转录、转录后加工、翻译、翻译后修饰和分泌过程，成为功能性抗体。;1. Ig轻链基因的染色体定位;V(variable)、J(joining)和C(constant)基因，分别编码免疫球蛋白轻链的V区(V和J)和C区。;V?85 J?=5 C?=1;V?30 JC?1 JC?2 JC?3 JC?6…9;三、胚系B细胞Ig重链基因的结构;2. Ig重链基因的组成;s;四、B细胞分化过程中的Ig基因重排;1. 重链基因首先重排。 D-J先重排，然后V-DJ重排，最后VDJ-C重排，形成完整的功能性Ig重链基因。 ;免疫球蛋白重链基因重排和表达示意图;等位基因排除(allelic exclusion):抑制另一条等位重链基因重排，以防一个细胞表达两种Ig。 诱导?链基因重排。 诱导细胞增殖。 如果第一条重链基因重排不成功，细胞重排第二条重链基因。如果两条重链基因均重排不成功，细胞死亡。;2. 轻链基因后重排 V-J先重排，然后VJ-C重排，形成完整的功能性Ig轻链基因。;免疫球蛋白?链基因重排和表达示意图;等位基因排除：抑制另一条等位k链基因重排。 同型排除(isotype exclusion)：抑制l链基因重排。 诱导细胞增殖。 如果第一条k链基因重排不成功，细胞重排第二条k链基因。如果两条k链基因均重排不成功，细胞重排l链基因。如果两条l链基因均重排不成功，细胞死亡。;（二）Ig基因重排的机理; DNA酶解 和修复系统;三、免疫球蛋白多样性的机理; Vk Jk 氨基酸 CCXCCC TGGACG P W T CCXCCC TGGACG P T CCXCCC TGGACG P P T CAG CCG GAT CAG CAG CGA TCA G CAGCCTTGGACG CAGCCTAGTTTCTGGACG;第四节 基因工程抗体; 用基因工程技术制备的抗体和抗体片段称为基因工程抗体(genetic engineering antibodies)。 ;副作用减小 抵抗酶解 根据需要设计大小 可连接各种物质 降低价格;一、嵌合抗体（chimeric antibody);PCR;三、单链可变区片段 (single chain fragment of variable region, sFv) ;双特异性Fv; (一)在哺乳动物细胞中表达 哺乳动物细胞中表达的基因工程抗体是糖基化的抗体，更加接近天然抗体。 ;(二)在微生物细胞中表达 产量高和产生速度快，但只表达纯蛋白 包涵体中表达 胞质内表达 分泌性表达 表达在噬菌体表面;(三)噬菌体展示文库(phage displ