抑制热休克蛋白70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗敏感性.PDF

J South Med Univ, 2017, 37(4): 475-481 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2017.04.09 ·475 · 基础研究 抑制热休克蛋白抑制热休克蛋白7070 表达可表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性 1，2 1，2 1，2 1，2 1，2 1 刘 健 ，刘 静 ，李胜泽 ，郑迎奥 ，郭苏阳 ，王 秀 1 2 蚌埠医学院药学院，安徽 蚌埠 233000 ；蚌埠医学院第一附属医院妇瘤科，安徽 蚌埠 233004 摘要：目的探讨抑制宫颈癌Hela229 细胞内热休克蛋白（HSP）70 表达对顺铂（DDP）化疗敏感性的影响。方法 3-（4 ，5-二甲基 噻唑-2）-2 ，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）及集落克隆法测定各因素对Hela229 细胞的抑制作用；溴化丙啶（PI）单染法及DAPI 检 测细胞的凋亡率；JC- 1 染色法测定线粒体膜电位（△Ψm）的变化；Western blotting 测定相关蛋白的表达；建立裸鼠动物模型测 定各因素体内的抑瘤作用。结果 宫颈癌细胞较正常宫颈细胞高表达HSP70 ；当HSP70 抑制剂与顺铂合用，细胞的存活率较单 用顺铂显著下降（P0.01）；PI 与DAPI 染色实验表明HSP70 抑制剂能增加顺铂诱导的细胞凋亡率；JC- 1 染色结果显示，HSP70 抑制剂处理后顺铂组细胞线粒体膜电位发生了明显的降低。Western blotting 实验结果显示HSP70 蛋白表达抑制剂与顺铂合用 较单用顺铂显著增加促凋亡蛋Bax/caspase-3 表达及caspase-3 活化；明显降低抑制凋亡相关蛋白Bcl-2 表达。裸鼠移植肿瘤模 型结果表明HSP70 抑制剂与顺铂合用能增强顺铂对模型小鼠肿瘤的抑制作用（P0.01）。结论 抑制HSP70 表达可增强宫颈癌 细胞对顺铂的敏感性，机制可能是通过抑制HSP70 ，进而调节凋亡相关蛋白的表达，促进宫颈癌细胞凋亡。HSP70 有望成为宫 颈癌基因治疗的一个新靶点。 关键词：热休克蛋白70 ；宫颈癌；热休克蛋白70抑制剂；顺铂 Inhibiting HSP70 expression enhances cisplatin sensitivity of cervical cancer cells 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1 1 LIU Jian , LIU Jing , LI Shengze , ZHENG Yingao , GUO Suyang , WANG Xiu 1Bengbu Medical College, Bengbu 233030, China; 2Department of Gynecological Oncology, First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu 233004, China Abstract: Objective To investigate the relationship between sensitivity to cisplatin (DDP) and the expression of HSP70 in cervical cancer cells in vitro. Methods Cervical cancer Hela229 cells treated with different concentrations of DDP and the HSP70 inhibitor (PFT-μ) were examined for cell viability using MTT assay and colony forming ability. The cell apoptosis was analyzed by flow cytometry with propidium iodide staining