增强化学发光酶免疫法对猪肉中盐酸克伦特罗的检测.pdf

第29卷 第3期 分析测试学报 V01．29No．3 2010年3月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrmnentalAnalysis) 215～2l9 ， 、‘ l研究报告i ， ， ，_．、 增强化学发光酶免疫法对猪 肉中 盐酸克伦特罗的检测 王 硕 ，李细芬，生 威，张 燕，杨泽琳 ，方国臻 (天津科技大学 食品工程与生物技术学院 食品营养与安全省部共建教育部重点实验室，天津 300457) 摘 要：建立了猪肉中克伦特罗(CLB)的直接竞争化学发光酶免疫检测(dc—CLEIA)方法。通过优化离子强 度、pH值确立了化学发光酶免疫法的标准曲线，优化后dc—CLEIA的检出限可达0．02 L。猪肉中的盐酸 克伦特罗用高氯酸提取、SPE净化后绘制基质曲线，基质曲线与标准曲线吻合，说明基质影响基本消除。测 定0．10、1．0、5．0 kg3个水平的添加回收率，平均回收率为 83％～98％，批内与批间的相对标准偏差均 小于 15％。进一步研究了dc—CLEIA与HPLC两种方法测定猪肉样品的相关性，结果显示两者测定结果相关 性良好，r：0．9647，说明所建立的直接化学发光酶免疫方法可用于实际样品的检测 ，结果准确可靠。 关键词：直接竞争；化学发光酶免疫法 ；克伦特罗；猪肉 中图分类号：R446．6 文献标识码 ：A 文章编号：1004—4957(2010)03—0215—05 doi：10．3969／j．issn．1004—4957．2010．03．001 DeterminationofClenbuterolResiduesinP0rkbvEnhanced ChemiluminescentEnzymeImmunoassay WANG Shuo，LIXi—fen，SHENG Wei，ZHANG Yan，YANG Ze—lin，FANG Guo-zhen (KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety，MinistryofEducationofChina，CollegeofFoodEngineeringand Biotechnology，TianjinUniversityofScienceandTechnology，Tianjin 300457，China) Abstract：A directcompetitiveenhancedchemiluminescentenzymeimmunoassay(dc—CLEIA) methodfordeterminationofclenbuterol(CLB)residuesinporkwasdeveloped．Theoptimalconcen— trationofphosphatebuffersolutionanditspH valuewereinvestigated．Theoptimalconcentrationof phosphatebuffersolutionwas0．2mol／Land itspH was7．4． Undertheoptimized condition，the limitofdetection(LOD)oftheassaywas0．02 L，withIC50valueoftheassaywas0．25 g／L． Matrixinterferenceswiththesensitivityoftheassaywassystematicallystudied．Theresultindicated thatthematrixeffectscouldbeeliminatedwhenporksampleswereextractedwithperchloricacidsolu- tion，andtheextractwascentrifugedat50