一种小菜蛾蛋白Western Blot定量检测方法.pdf

一种western blot新型高效蛋白酶抑制剂.pdf (19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114544942 A (43)申请公布日 2022.05.27 (21)申请号 202210122016.4 (22)申请日 2022.02.09 (71)申请人上海司鼎生物科技有限公司地址 2

2023-05-07 约3.8千字 4页立即下载

Western Blot 蛋白印迹法 (新手).doc Western Blot 蛋白印迹法－－详细中文操作指南（新手适用） ? 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体，并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。Western使用的探针是抗体，它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。仪器：高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、—20℃低温冰箱、垂直板电泳转移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床。试剂：单去污剂裂解液、0.01mol/L PBS (pH7.3)、10％分离胶、4％浓缩校、G250考马斯亮蓝溶液、0.

2018-06-17 约9.4千字 12页立即下载

Western-blot实验方法步骤.pptx Western-blot实验方法步骤共34页，您现在浏览的是第1页!Western-blot试验Western-blot实验方法步骤共34页，您现在浏览的是第2页!概论它结合了凝胶分辨力高和固相免疫测定的特异敏感等多种优点，与免疫沉淀法比较，这种方法无需对靶蛋白进行同位素标记。几乎总在变性条件下进行，可以避免溶解、聚集以及靶蛋白与外来蛋白的共沉淀等诸多问题。具有从混杂抗原中检测出特定抗原，或从多克隆抗体中检测出单克隆抗体的优越性，还可以对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析，具有蛋白质反应均一性，固相膜保存时间长等优点。被广泛地用于蛋白质研究，基础医学和临床医学的研究。Western-blot实

2024-01-26 约7.69千字 34页立即下载

Western-blot实验方法步骤.ppt Western-blot 试验概论它结合了凝胶分辨力高和固相免疫测定的特异敏感等多种优点，与免疫沉淀法比较，这种方法无需对靶蛋白进行同位素标记。几乎总在变性条件下进行，可以避免溶解、聚集以及靶蛋白与外来蛋白的共沉淀等诸多问题。具有从混杂抗原中检测出特定抗原，或从多克隆抗体中检测出单克隆抗体的优越性，还可以对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析，具有蛋白质反应均一性，固相膜保存时间长等优点。被广泛地用于蛋白质研究，基础医学和临床医学的研究。溶解蛋白策略 1 使用剧烈的条件以确保细胞蛋白能全部裂解下来，但这可能导致免疫反应性的丢失。 2 采用温和的条件以助于保持蛋白质的天然状态，但这造成

2019-05-26 约6.92千字 34页立即下载

Western blot(蛋白印迹法)详细步骤.doc Western blot（蛋白印迹法）详细步骤组织的研磨准备：研钵、研磨棒、EP管、药匙、液氮、液氮匙、自封袋、一次性手套、棉手套步骤：①用研磨棒将装有冻存组织的EP管敲碎，取出组织，在研钵中盛满液氮，用力敲碎组织，研磨。 ②研磨过程中一旦液氮干了，立即加入液氮，保持研磨在液氮中进行，直至组织呈干粉状。 ③用在液氮中浸泡过的药匙将研磨好的粉末盛入新的EP管中。 ④装有组织粉末的EP管现在液氮中保存，待所有组织都研磨结束后装入自封袋，于-80℃保存。注意：1.研钵使用前要用锡纸包口、研磨棒用锡纸包头，在烘箱中烘烤180℃至少3h以上。 2.

2018-09-24 约4.63千字 5页立即下载

细胞总蛋白的制备, SDS-PAGE,Western Blot.docx 医学生物学研究技术与实验实验报告实验名称：细胞总蛋白的制备, SDS，Western Blot一、实验目的1. 掌握SDS直接裂解细胞法提取蛋白质2. 掌握Lowry法测定蛋白质浓度的原理3. 掌握SDS分离蛋白质的原理和技术4. 掌握半干转移的操作和Western Blot 的原理和技术二、实验原理1. 蛋白质提取常见裂解方法极其原理。蛋白质的抽提是指破碎过程中，将生物材料在水，缓冲液或稀盐溶液等适当溶剂中浸泡，使胞内的蛋白质等内容物释放到溶剂中。血浆，消化液和分泌液等体液中可溶性蛋白质，可不经抽提，直接进行分离。细胞内一般蛋白质的抽提，应先将细胞膜或细胞壁破碎，然后用适当溶剂将蛋白质溶出，

2016-12-27 约4.91千字 9页立即下载

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上 ....doc Western Blot详解Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、分类i.放射自显影ii.底物化学发光ECLiii.底物荧光ECFiv.底物DAB呈色三、主要试剂四、主要步骤五、实验常见的问题指南1.参考书推荐2.针对样品的常见问题3.抗体4.滤纸、胶和膜的问题5.Marker的相关疑问6.染色的选择7.参照的疑问8.缓冲液配方的常

2017-05-05 约2.12万字 17页立即下载

使用image J检测Western Blot条带灰度值.ppt 使用Image J检测Western Blot 条带灰度值大尾巴狼1223打开图片使图片调节呈黑白图片由彩色变为黑白一定要封口点击封口的图形面积柱状图即条带灰度值

2019-05-07 约小于1千字 11页立即下载

使用image J检测Western Blot条带灰度值.ppt 打开图片使图片调节呈黑白图片由彩色变为黑白一定要封口点击封口的图形面积柱状图即条带灰度值谢谢！

2019-05-04 约小于1千字 11页立即下载

western blot原理及操作方法.ppt Western blot 原理分类主要试剂操作步骤常见问题原理 Western?Blot（蛋白免疫印迹）采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE)，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检

2016-11-30 约4.55千字 24页立即下载

western-blot条带分析及解决方法.docx Western条带分析及解决方法---刘健锋 Western 条带分析及解决方法---刘健锋现象反影(白色条带,黑色背景) 显影后膜上条带处变为黄色信号弱或无高背景缘由 HRP过高(背景较高) HRP过高(敏感性太高) HRP过高引起底物快速耗竭抗体-抗原系统敏感性过低转膜不充分/过转 HRP或底物活性降低 HRP过高(背景较高) 封闭时间缺乏抗体与封闭液有穿插 TBST洗脱缺乏暴光时间过长抗原-抗体浓度过高解决至少成倍稀释一抗/二抗(可4~10倍)*注1 至少成倍稀释一抗/二抗(可4~10倍)*注2 至少成倍稀释一抗/二抗(可4~10倍)*

2024-07-05 约5.16千字 11页立即下载

Western-blot实验方法步骤试题.ppt 免疫沉淀法检测表达蛋白可用于检测并定量分析多种蛋白质复合物中的靶抗原。很敏感，可检测出100pg的放射性标记蛋白。当与SDS并用时，即可用于分析外源基因在原核和真核宿主细胞中的表达情况。操作步骤靶蛋白的放射性标记裂解细胞特异性免疫复合物的形成免疫复合物的收集和纯化放射性标记蛋白质的免疫沉淀分析靶蛋白的放射性标记同位素通常是35S，其半衰期为87.1天，同位素是以35S－标记蛋氨酸或35S－蛋氨酸和半胱氨酸。这些氨基酸是哺乳动物细胞的必须氨基酸，必须由培养基中提供。培养基中含有高浓度的蛋氨酸和半胱氨酸，为了增加同位素标记氨基酸的渗入率，可去除培养基中的蛋氨酸或同时去除

2017-03-20 约6.91千字 34页立即下载

Western_Blot_原理和操作方法(全)课件.doc Western Blot 原理和操作方法（全）工作原理蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)由于无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出10-9-10-12mol的样品,凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶等优点而受到广泛的应用.SDS是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量.PAGE能有效的分

2017-05-24 约3.45万字 39页立即下载

Western-blot实验方法步骤解析.ppt 免疫沉淀法检测表达蛋白可用于检测并定量分析多种蛋白质复合物中的靶抗原。很敏感，可检测出100pg的放射性标记蛋白。当与SDS并用时，即可用于分析外源基因在原核和真核宿主细胞中的表达情况。操作步骤靶蛋白的放射性标记裂解细胞特异性免疫复合物的形成免疫复合物的收集和纯化放射性标记蛋白质的免疫沉淀分析靶蛋白的放射性标记同位素通常是35S，其半衰期为87.1天，同位素是以35S－标记蛋氨酸或35S－蛋氨酸和半胱氨酸。这些氨基酸是哺乳动物细胞的必须氨基酸，必须由培养基中提供。培养基中含有高浓度的蛋氨酸和半胱氨酸，为了增加同位素标记氨基酸的渗入率，可去除培养基中的蛋氨酸或同时去除

2017-01-09 约6.91千字 34页立即下载

字花科蔬菜-小菜蛾-小菜蛾绒茧蜂.ppt 十字花科蔬菜——小菜蛾——小菜蛾绒茧蜂小菜蛾的定向行为01不同蔬菜对小菜蛾成虫的引诱02小菜蛾触角在定向行为中的作用03小菜蛾绒茧蜂的定向行为04蔬菜释放的挥发性物质对小菜蛾绒茧蜂的引诱05小菜蛾利它素的引诱作用06学习行为对小菜蛾绒茧蜂行为的影响07触角在小菜蛾绒茧蜂定向行为中的作用08主要内容1小菜蛾的定向行为小菜蛾Plutellaxylostella(L.)，属鳞翅目，菜蛾科，是十字花科蔬菜重要害虫，已成为世界性大害虫之一。十字花科蔬菜—小菜蛾—小菜蛾绒茧蜂互益素利它素利它素010203041小菜蛾的定向行为1.1不同蔬菜对小菜蛾成虫的引诱十字花科蔬菜的特异性化合物成虫寻找和定位能力异硫

2025-02-09 约1.56千字 10页立即下载