木蝴蝶黄酮标准品的制备及总黄酮分离纯化工艺研究的中期报告.docx

木蝴蝶黄酮标准品的制备及总黄酮分离纯化工艺研究的中期报告 一、制备木蝴蝶黄酮标准品 1.收集木蝴蝶：在野外采摘新鲜的木蝴蝶植物，洗净后晾干。 2.粉碎木蝴蝶植物：将晾干的木蝴蝶植物用研钵或搅拌器研碎成细粉末。 3.提取木蝴蝶黄酮：将木蝴蝶植物粉末放入烧杯中，加入80%乙醇（固液比1:5），在室温下拌匀，静置12小时，然后过滤得到提取液。 4.浓缩提取液：将提取液置于旋转蒸发器中进行浓缩，至浓缩液体几乎干燥。 5.纯化：将提取物溶于乙醇水（1:1），在硅胶柱上进行柱层析，使用80%乙醇作为洗脱液，得到纯化的木蝴蝶黄酮标准品。 二、总黄酮分离纯化工艺研究 1.提取：将木蝴蝶植物粉末加入80%乙醇中，在室温下浸泡24小时，然后筛选出提取物。 2.过滤：用滤纸过滤提取物，得到粗提取液。 3.浓缩：将粗提取液置于旋转蒸发器中浓缩至几乎干燥。 4.脱色：将浓缩液溶于十倍量的乙醇水中，在80℃的水浴中加热2小时，然后使用活性炭脱色。 5.柱层析：采用硅胶柱层析，洗脱液采用不同极性的有机溶剂或有机溶剂和水的混合物，分离出总黄酮物质。 6.薄层色谱：对收集到的柱层析分离物进行薄层色谱分析，确定所含黄酮类化合物，并进行针对性的纯化。 7.结晶：使用结晶剂对纯化后的黄酮类化合物进行结晶，得到纯品。 本工艺流程经过多次优化，可以快速高效地分离纯化出总黄酮。