新课标-浙科版-选修3-工具酶及基因工程.ppt

* * 将大鼠的生长激素基因导入到小鼠受精卵中，得到的“超级鼠”。 人耳鼠 遗传工程 第一章 基因工程 广义的“遗传工程”包括细胞水平上的遗传操作(细胞工程)和分子水平上的遗传操作(基因工程)。 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒——载体 主要存在于微生物中，能识别特定的核苷酸序列，并且在特定切点上切割DNA。 可以把两种来源的DNA（用同一种限制酶切割）的黏性末端黏合起来。 把外源基因送入受体细胞的工具。 第1节 工具酶的发现和基因工程的诞生 G A A T T C C T T A A G G C T T A A 黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间碱基正好互补配对。 A A T T C G DNA连接酶: 作用：可以把两种来源的DNA（用同一种限制 酶切割）的黏性末端黏合起来。 质粒： 存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能自主复制的很小的环状DNA分子。 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒——载体 基因工程操作的工具 剪切 拼接 导入 表达 （一）获得目的基因 （二）形成重组DNA分子 （三）将重组DNA分子导入受体细胞 （四）目的基因的检测和表达 第2节 基因工程的原理和技术 1、筛选含有目的基因的受体细胞 2、目的基因的表达 步骤一 获得目的基因 人工合成 利用PCR技术扩增 已知序列： 从基因文库获得 未知序列： ( DNA library ) 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) 氢键断裂，形成单链DNA。 引物与DNA模板结合，形成局部双链。 在酶的作用下，不断延伸，合成双链DNA。 多次循环，获得大量双链DNA分子。 PCR技术扩增 鸟枪法：散弹射击法 供体细胞DNA 限制酶 许多DNA片段 载入 运载体 导入 受体细胞 扩增 产生特定性状 分离 目的基因 从基因文库获得 目的基因的mRNA 逆转录 单链DNA 合成 双链DNA（目的基因） 蛋白质氨基酸序列 推测 mRNA的核苷酸序列 推测 结构基因的核苷酸序列 化学合成 目的基因 人工合成法 逆转录法 根据已知氨基酸序列直接合成DNA 步骤二 形成重组DNA分子 *