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微生物谷氨酰胺转胺酶的反应特性研究的开题报告

标题：微生物谷氨酰胺转胺酶的反应特性研究

研究目的：探究微生物谷氨酰胺转胺酶催化反应的特性，为该酶的应用研究提供理论基础。

研究内容：

1.文献综述，对该酶的基本性质、催化机理及研究现状进行回顾和总结。

2.克隆和表达该酶的基因，纯化该酶并建立其活性测定方法。

3.考察该酶的最适温度、最适pH值和催化剂反应时间等基本反应条件，以评估酶的催化效率。

4.研究该酶对不同基质的催化特性，以评估酶的底物适用范围。

5.研究该酶对不同抑制剂的抑制能力，以探究酶的抑制机理。

预期成果：获得微生物谷氨酰胺转胺酶的基本性质及催化特性，并探究其抑制机理。为该酶的应用研究提供理论基础。

研究方法和技术路线：

1.文献综述法：综合查阅相关文献，了解酶的基本特性和理论研究现状。

2.分子生物学实验：从合适的微生物体中克隆和表达该酶的基因，通过常规纯化手段得到纯化酶样品。

3.酶学实验：对纯化酶进行活性测定，并考察其最适温度、最适pH值等基本反应条件及对不同基质的催化特性等。

4.化学试剂法：通过添加不同抑制剂以及其他化学试剂，考察其对酶催化活性的影响，以探究抑制机理。

技术路线方案如下：

Step1：检索相关文献，了解微生物谷氨酰胺转胺酶的催化特性和理论研究现状；

Step2：从合适菌株中克隆和表达该酶的基因，得到纯化的酶样品；

Step3：测定酶的活性并考察其最适反应条件及对不同基质的催化特性；

Step4：在不同条件下添加抑制剂进行酶活性测定，以探究抑制机理；

Step5：对实验结果进行分析，总结结论，并撰写研究成果报告。

时间安排：预计两年时间完成，第一年主要进行文献调研、实验条件调整、酶纯化和活性测定等准备工作；第二年主要进行酶催化反应特性、抑制研究以及数据统计和结论分析等工作。

参考文献：

1.杨世英,陈勇杰.谷氨酰胺转胺酶及其在生物过程中的作用[J].中国实用科技信息,2008,25(31):209-209.

2.WuJ,HeY,YangS,etal.CharacterizationofanovelaminotransferasefromBacillussubtilisinvolvedinbiosynthesisoftheisoleucineprecursorthreonine[J].FEBSJournal,2014,281(10):2409-2424.

3.WuF,ZhouP,ZhuY,etal.Inductionofexpression,purification,crystallizationandpreliminaryX-raycrystallographicanalysisoftheN-acetylornithinetranscarbamylasefromEscherichiacoli[J].ActaCrystallographicaSectionFStructuralBiologyCommunications,2010,66(Pt6):602.

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