实验三芳香族化合物的定定量分析高效液相色谱法.pdf
实验三
实验三
芳香族化合物的定性、定量分析—高效液相色谱法
芳香族化合物的定性、定量分析高效液相色谱法
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1实验目的
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n了解并掌握高效液相色谱法的别离原理
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n学习并掌握高效液相色谱仪的操作
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n掌握保存时间初步定性和外标法的定量方法
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n学习使用EmpowerPro中文版色谱工作站处
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理数据
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2实验原理和仪器结构
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2.1高效液相色谱法别离原理
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高效液相分配色谱法有反相或正相色谱法两种别离模
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式。反相高效液相色谱法是指采用非极性固定相〔如C18
式。反相高效液相色谱法是指采用非极性固定相〔如C18
等〕、极性溶剂〔如甲醇等〕作为流动相的一种别离模式。
等〕、极性溶剂〔如甲醇等〕作为流动相的一种别离模式。
正相色谱法与反相色谱法相反,它是以极性固定相〔如带
正相色谱法与反相色谱法相反,它是以极性固定相〔如带
有氨基和氰基的固定相〕,非极性溶剂〔正己烷等〕为流
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动相的一种液相色谱别离模式。极性较强或亲水的样品分
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子和反相柱中的固定相上的相互作用较弱,分配较少,因
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此随着流动相较快流出,反之,疏水性相对较强的分子和
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固定相间存在较强的相互作用,在柱内保存的时间相对较
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HPLC别离的机理
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色谱柱别离示意图
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本实验采用反相色谱别离模式
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2.2仪器流程
2.2仪器流程
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六通阀的工作原理
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装样
装样进样
进样
〔LOAD〕进样阀〔INJECT〕
淋洗液淋洗液
废液
废液
样品
样品至分离柱
至别离柱
样品环