2.2.2 动细胞融合与单克隆抗体.ppt

* 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 植物体细胞杂交 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 杂种细胞AB 杂种植株 脱分化 愈伤组织 再分化 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 动物细胞融合 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2.过程： 灭活的病毒（丧失感染性、保留抗原结构） 原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 3、动物细胞融合基本原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激、振动、离心 聚乙二醇（PEG） 例如：仙台病毒 5、实现动物细胞融合有什么意义呢？ 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； 重要用途：制备单克隆抗体。 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 克服远源杂交不亲和，获得杂交植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 单克隆抗体 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 　 　1．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　2．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 　3、在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。　 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 信息： 那么，如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 一个B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂种细胞 动物细胞培养技术 1、设计方案： 动物细胞融合 创始人：米尔斯坦 单克隆抗体 （既能产生特异性抗体，又能大量繁殖） 2、单克隆抗体（概念） 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂种细胞才能活 动物细胞培养 3.单克隆抗体制备过程 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 4、单克隆抗体的特点和应用 与常规抗体相比，单克隆抗体纯度高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 特点： 5 应用： 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，至今，全球已经报道的单克隆抗体达十万多种，用于诊断治疗的达五百多种。主要的应用有： １ 可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点。 可用于疾病治疗 就目前的临床实验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗，也有少量的用于其他疾病的治疗。 3 可用于运载药物 （作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹“。） 　　　“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物（放射性同位素，化学药物，细胞毒素） 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） 诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞 D 3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D