2017整理2.2.2_动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

植物体细胞杂交过程示意图 阅读课本P52及识图2-23，说出动物细胞融合的过程，并思考： 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 2.3单克隆抗体的应用 【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ 　） B淋巴细胞 　 B．T淋巴细胞 C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞 【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 * * * 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 诱导的手段？ 融合后细胞的类型？ 原理？ 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞 诱导的手段？ 融合后细胞的类型？ AB杂种细胞遗传物质 有什么特点？ 三种AA、AB、BB（A、B） 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理？ 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 灭活丧失感染性 保留融合活性 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 获得杂种细胞、 制备单克隆抗体 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 细胞膜的 流动性 动物细 胞融合 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 细胞膜的 流动性 植物体 细胞杂交 用途 诱导手段 细胞融合的方法 细胞融合的原理 比较项目 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 B B A 强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 分化 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体！ 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 2.1单克隆抗体的概念 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。 2.2单克隆抗体的制备 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ ② 会有几种融合方式？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ ⑤ 如何大规模进行培养