微生物培养练习.doc

1．(10分)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力____________。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 [答案]　(1)原油　选择(2)平板划线法　稀释涂布平板法 (3)强(4)干热灭菌　高压蒸气灭菌　火焰 (10分)(2013·东北三校一模)现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免的每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物用纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题。 (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在_______ 的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以________为碳源、并加入________的培养基上筛选周围有________的菌落。 (2)如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性________(一定相同、不一定相同、一定不同)，可以通过________________ 进行定量测定。 (3)根据测定结果，①环节常选择毛霉，则②中获得的酶是________酶。该酶至少包括__________________________三个组分。 (4)生产中可以满足④环节的常见菌种是________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意________________，④过程要注意避免_____________________。 (5)该技术虽然有广阔的前景，但存在酶的成本高等问题，为了降低成本主要从以下几方面入手改进该过程。首先要通过________等技术手段对产酶微生物改造，提高酶的产量。其次，可利用________等技术使酶能够重复利用。 [答案]　(1)富含纤维素(其他合理答案也可，如落叶较多等)　纤维素　刚果红　透明圈 (2)不一定相同　对纤维素酶催化纤维素分解后所产生的葡萄糖 (3)纤维素　C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶 (4)酵母菌　发酵装置密闭(或保证无氧条件等)　杂菌污染 (5)基因工程(基因突变)　固定化酶 (10分)生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定了知识基础和能力基础。请回答下列有关生物技术实践中的问题。 (1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有________灭菌、干热灭菌和________灭菌。 (2)在果醋、泡菜的制作过程中，需要氧气的是________；在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是________。 (3)血红蛋白的提取和分离的实验中，在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是________。如果红色区带________，说明色谱柱制作成功。 (4)进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、_______、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是________。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中______ __ 。 (5)橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料________和有效成分________等问题。 [答案]　(1)灼烧　高压蒸汽(2)果醋　用果胶酶处理 (3)准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致　均匀一致的移动 (4)外植体消毒　醋酸洋红法　激素的种类及其浓度配比(5)焦糊　水解 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。 实验步骤： (1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 (2)为了得到更加准确的结果，你选用________法接种样品。 (3)适宜温度下培养。 结果分析： (1)测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是________，其理由是_____