生物实验专题复习(适用于学业水平测试).doc
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高二生物学业水平测试实验专题复习
(知识要点梳理)
必修1 分子与细胞
认识显微镜的结构,学会使用显微镜
一、光学显微镜的结构、放大倍数计算方法
结构:
光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)
机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。
注:目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。
放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积
注:显微镜放大倍数是指长度和宽度,而不是面积。
二、显微镜的使用:置镜(装镜头)→对光→置片→调焦→观察
1.安放。显微镜放置在桌前略偏左,距桌缘8—10cm处,装好物镜和目镜。
2.对光。转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜,同时把反光镜转向光源,直至视野光亮均匀适度。(调节视野亮度用遮光器和反光镜,光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。)
3.低倍镜观察。将装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋,俯首侧视镜筒慢慢下降,直到物镜接近装片(约0.5cm),左眼观察目镜,旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,看到物像时调节细准焦螺旋,直到物像清晰。
4.高倍镜观察。找到物像后,把要观察的物像移到视野中央,转动转换器换上高倍镜,调反光镜或光圈调节视野光亮,然后用细准焦螺旋调节,直到物像清楚为止。
问1:低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?(ABC)
A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反,盖玻片在下面 D、未换目镜
问2:放大倍数与视野的关系:
放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长;
放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。
5.装片的制作和移动:制作:滴清水→放材料→盖片
移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)
6.污点判断:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;
2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;
3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。
7.完毕工作。使用完毕后,取下装片,转动转换器,逆时针旋出物镜,旋进镜头盒;取出目镜,插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。
检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
一、实验原理(理解):
1、可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
4、淀粉遇碘变蓝色。
二、实验材料用具、方法、步骤(了解)
斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水等。
鉴定物质 实验试剂 实验现象 注意事项 还原糖 斐林试剂甲、乙 砖红色沉淀 试剂甲、乙等量混合、现配现用、水浴加热 脂 肪 苏丹III(IV) 橘黄色(红色) 临时切片可用显微镜观察 蛋白质 双缩脲试剂A、B 紫 色 先加试剂A1ml,后加B 4滴,摇匀,即显色 淀 粉 碘 液 蓝 色 若加淀粉酶,可水解为麦芽糖(还原性) 三、实验结果的分析(应用) 与酶实验的联系
观察DNA、RNA在细胞中的分布
一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
二.实验原理:
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
三.方法步骤:
操作步骤 注意问题 解释 取口腔上皮细胞制片 载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液
用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞
将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果
保持细胞原有形态
消毒为防止感染,漱口避免取材失败
固定装片 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min 改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸 染色 滴2滴吡罗红
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