质谱法分析大肠癌组织中踝蛋白的磷酸化修饰-分析化学.pdf

( ) 第 40 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 研究报告 第 10 期 2012 年 10 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1500~1506 : / DOI 10.3724SP.J.1096.2012.20027 质谱法分析大肠癌组织中踝蛋白的磷酸化修饰 1 2 1 2 1 孙 莉 赵海丰 郭宏华 扬光远 何成彦 1 3 3 * 3 师庆红 文 雪 王小婷 赵丽纯 1 ( ) 2 ( ) 吉林大学中日联谊医院, 长春 130033 佳木斯大学附属第一医院, 佳木斯 154003 3 ( ) 吉林大学药学院, 长春 13002 1 , , 、 摘 要 踝蛋白的磷酸化修饰 特别是肿瘤等病理条件下的踝蛋白磷酸化状态 与肿瘤的发病 转移机理密切 。 、 ( ), 相关 本研究采用盐析 离子交换层析和电泳分离并纯化了人大肠癌组织中的踝蛋白 Talin 经胰酶水解获 3+ , 得其肽段混合物 进一步分别利用固定化 Fe 亲和层析和 TiO2 亲和层析在酸性条件下对其中磷酸化修饰肽 , 。 , 段进行吸附 并以 1% 氨水进行洗脱 在 Michrom Magic C18 色谱柱上 以A: 99% 水 1% 乙腈 0.1% 甲酸和 + + , B: 99% 乙腈 1% 水 0.1% 甲酸两种流动相进行梯度洗脱分离 采用 ESI 质谱进行依赖数据的二级子离子扫 + +