植物人工繁殖.ppt

影响幼胚培养的因素：A、天然提取物及某些蛋白制品；1934年银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用；1941年曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚)。此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。B、渗透压的作用：胚发育早期要求较高的的渗透压，而随着胚的发育逐渐降低。第61页,共85页，2024年2月25日，星期天C、植物激素及生长调节剂的作用：加入适当浓度的生长素、细胞分裂素可以促进胚的发育，单一激素影响发育。D、其他因素：pH值以5.4-5.8适宜多数幼胚。温度25-30oC适宜多数植物。第62页,共85页，2024年2月25日，星期天2、胚珠培养及子房培养：胚珠培养包括授粉胚珠和未授粉胚珠的培养。1942年最早在兰花上获得成功，缩短了授粉到成熟的时间。1980年成功培养了未授粉的非洲菊、烟草的胚珠，获得了单倍体植株。第63页,共85页，2024年2月25日，星期天胚珠培养：将胚珠从母株中分离出来，放在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长发育，以致形成幼苗的过程。根据胚珠是否受精分为两类：未受精胚珠的培养受精胚珠的培养胚珠培养技术大孢子或卵单倍体植株种子愈伤组织再生植株第64页,共85页，2024年2月25日，星期天胚珠培养的方法子房表面灭菌剖开子房壁取出胚珠接种培养如培养受精胚珠，摘取授粉时间合适的子房；如培养未受精胚珠，则在授粉前摘取子房胚珠或带胚珠的胎座第65页,共85页，2024年2月25日，星期天将子房从母株上摘下，放在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。子房培养包括授粉子房和未授粉子房培养。1949年和1951年最早在黄瓜、番茄、菜豆、草莓、烟草等植物上获得成功。授粉子房培养形成成熟果实和种子；未授粉子房培养形成小的无籽果实。受精后的子房仍需进行表面消毒后再接种。而未受精子房可将花被表面消毒后，在无菌条件下直接剥取子房接种。子房培养只需较简单的培养基即可形成果实，并含成熟种子。子房培养技术子房培养的方法授粉或授粉后的子房表面消毒接种培养第66页,共85页，2024年2月25日，星期天影响胚珠培养的因素：（1）材料选择：品种间的差异、胚囊发育时期（2）材料的消毒：污染、消毒剂（3）培养基：A.植物激素授粉胚珠：细胞分裂素对胚发育通常有促进作用。未授粉胚珠：外源激素不利于向日葵孤雌生殖。矮牵牛未授粉胚珠培养不需激素，其他需要适当添加。B.有机物：添加有机附加物可以促进授粉胚珠的发育。C.蔗糖浓度：3-12%，通常5%，高浓度利于孤雌生殖。（4）胎座组织的影响：促进胚的发育。第67页,共85页，2024年2月25日，星期天3、胚乳培养胚乳培养：是指将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术。被子植物胚乳是由2个单倍的极核和1个单倍的精子结合而成的3倍体组织。由它可获得无子结实的3倍体植株，进而可将它加倍成6倍体植株。裸子植物很特殊，它的胚乳在受精前就已形成。裸子植物的胚乳为配子体的一部分，由大孢子直接分裂发育而成，因此是单倍体组织。胚乳培养过程含胚乳的果实或种子表面消毒无菌条件下胚乳的剥离接种培养基培养培养室温度25-27℃，黑暗或弱光下第68页,共85页，2024年2月25日，星期天胚乳培养应注意的问题：（1）确定适宜的发育时期（生长旺盛期）；（2）严格区分胚乳和其他组织；（3）合理使用激素；（4）注意光、温条件（24-280C；黑暗条件）。第69页,共85页，2024年2月25日，星期天离体授粉技术：将未授粉的离体胚珠或子房接种在培养上，然后在试管内撒播花粉。在离体的、受人工控制的环境下，通过技术操作来完成植物雌雄配子体的融合。受精后的胚珠进一步发育成种子。根据授粉的部位可分为：（1）离体柱头授粉：（2）离体子房授粉：（3）离体胚珠授粉：离体受精技术：在离体条件下完成被子植物精、卵融合，并将受精所所生的“人工合子”培养成再生植株。离体受精技术的突破的技术前提：（1）雌配子和雄配子分离技术（2）单对原生质体(精卵)融合技术（3）微培养技术(合子培养与植株再生技术)4、离体授粉与离体受精第70页,共85页，2024年2月25日，星期天培养部位意义类型外植体选取取材时间培养方法胚珠1.克服杂种胚败育2.进行试管受精3.用于单倍体育种1.受精胚珠培养2.未受精胚珠培养选取合适子房，表面消毒后取出胚珠球形胚长大形成种子，继而形成幼苗子房1.诱导