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EV71类病毒颗粒的表达及免疫原性的初步评价的开题报告

题目：EV71类病毒颗粒的表达及免疫原性的初步评价

研究背景与目的：

手足口病（HFMD）是一种由肠道病毒引起的高度传染性疾病。其中，EnterovirusA71(EV71)是HFMD的主要病原体之一，往往会引发严重的神经系统并发症，如脑膜炎、脑炎和急性弛缓性麻痹等，威胁儿童的健康与生命。

研究表明，EV71具有高度变异性，不同基因型之间差异明显，因此需要针对不同基因型开发有效的疫苗。目前，针对EV71的疫苗中，主要是采用了EV71的VP1蛋白作为免疫原。但是，由于VP1蛋白的高度变异性，疫苗的免疫保护效果欠佳。

因此，本研究的目的是：利用重组蛋白技术表达和纯化不同基因型EV71类病毒颗粒，并对其免疫原性进行初步评价，以寻找更有效的EV71疫苗免疫原。

研究方法：

（1）构建不同基因型EV71的表达载体–pFastBac1-EV71-VP0-VP3-VP1，利用昆虫杆状病毒表达系统在Sf9细胞中表达EV71类病毒颗粒。

（2）利用纯化技术提取并纯化EV71类病毒颗粒。

（3）通过Westernblot、ELISA、酶联免疫吸附实验等方法初步评价不同基因型EV71类病毒颗粒的免疫原性。

研究意义：

本研究通过构建表达载体和重组蛋白技术，成功表达和纯化了不同基因型EV71类病毒颗粒，并初步评价了其免疫原性。将为寻找更有效的EV71疫苗免疫原提供新的思路和方法。

预期结果：

预计本研究能够成功表达不同基因型EV71类病毒颗粒，并初步评价其免疫原性。同时，也预计能够发现更有效的EV71疫苗免疫原，并为其进一步研究提供数据支持。

研究局限性：

本研究仅初步评价不同基因型EV71类病毒颗粒的免疫原性，因此在评价其免疫保护效果和机制等方面仍需进一步的研究和探讨。同时，昆虫杆状病毒表达系统的稳定性和成本问题也需要考虑。