IBDV-VP2多表位串联基因的原核表达及表达产物免疫原性分析的开题报告.pdf

IBDV-VP2多表位串联基因的原核表达及表达产物免

疫原性分析的开题报告

摘要：

传染性法氏囊病是一种严重危害禽类健康的疾病，病原体为法氏囊

病病毒（IBDV）。VP2蛋白是IBDV的主要抗原蛋白，是开发疫苗和诊断

试剂的理想目标。本研究构建了IBDV-VP2多表位串联基因并进行原核表

达，经SDS、Westernblot和ELISA等多种方法进行了表达产物的

免疫原性分析。结果表明，所构建的多表位串联基因在原核表达系统中

得到了表达，并且其表达产物具有较高的免疫原性，为后续研究开展提

供了理论基础和实验依据。

关键词：法氏囊病病毒；VP2蛋白；多表位串联基因；原核表达；

免疫原性分析

一、研究背景和意义

法氏囊病（Infectiousbursaldisease,IBD）是一种由法氏囊病病毒

（IBDV）引起的传染性疾病，主要侵犯禽类生产，常造成急性病程、高

死亡率和生产损失，尤其是从4至7周龄的肉鸡。目前，预防法氏囊病

的主要方法是通过疫苗接种来抵抗该疾病的侵害，而VP2蛋白是IBDV的

主要抗原蛋白，是开发疫苗和诊断试剂的理想目标。

多表位串联的蛋白质是指两个或多个蛋白质序列以共价或非共价的

方式串联而成的蛋白质大分子，相对于单一蛋白质，多表位蛋白质的免

疫原性更高，其制备成的疫苗也会更加有效。因此，构建IBDV-VP2多表

位串联基因并进行表达及免疫原性分析，有望为开发高效预防法氏囊病

疫苗提供理论支持和实验基础。

二、研究内容和方法

1.构建IBDV-VP2多表位串联基因：IBDV-VP2基因序列与I型家禽

细小病毒VP1序列在C端序列中存在共同结构域，因此，选取VP2序列

与VP1序列进行多表位蛋白质构建。

2.原核表达IBDV-VP2多表位串联蛋白质：将构建后的多表位串联基

因克隆到原核表达载体pET-32a(+)，在大肠杆菌中进行表达。

3.SDS分析：对表达产物进行SDS电泳分析，观察表

达产物的分子量。

4.Westernblot分析：利用Westernblot方法分析表达产物的免疫

原性及反应特异性。

5.ELISA分析：利用ELISA方法进一步分析表达产物的免疫原性及

其与抗IBDV抗体的结合情况。

三、预期结果和意义

本研究预计构建成功IBDV-VP2多表位串联基因，并在原核表达系

统中获得表达。通过SDS、Westernblot和ELISA等多种方法对表

达产物进行免疫原性分析，预计得到的表达产物具有较高的免疫原性，

并且免疫原性较单一VP2蛋白提高。这为开发高效预防法氏囊病疫苗提

供了理论支持和实验基础。