《医学遗传学实验》——小鼠睾丸染色体制备.ppt

* * 实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备 医学遗传学系 一、实验目的 1、掌握快速制备动物染色体的方法； 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。 二、实验原理 活体内注射秋水仙素使细胞停止在分裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染色体分散，从而得到染色体的中期分裂相;固定剂处理使染色体结构保持完整，防止染色体收缩。 静置5min 三、实验内容与步骤 腹腔注射秋水仙素 处死小鼠 （损伤脊髓法） 取睾丸，剥离白膜， 剪碎曲细精管 第一次低渗：0.4%KCL,37℃,5ml→10 ml,吹打2 min 37℃ 静置2min 弃上清 第二次低渗： 0.4%KCL, 37℃,10ml， 吹打2min, 37℃静置5min 弃上清 固定：8ml新鲜固定液，10 min 离心：1000rpm，8min 弃上清 软化：60%冰醋酸，3ml，3min 滴片，烘干 染色：室温下10min 细流冲洗，晾干 镜检观察