一原发性红斑肢痛症家系的SCN9A基因突变检测与排除定位的开题报告.docx
一原发性红斑肢痛症家系的SCN9A基因突变检测与排除定位的开题报告
【摘要】
一原发性红斑肢痛症(Erythromelalgia,EM)是一种罕见的遗传性疾病,其主要症状为手脚肢体疼痛、红斑、发热等现象。研究表明,EM病因与SCN9A基因的突变有关。为了进一步了解该家系中是否存在SCN9A基因突变,并排除其它可能的遗传基因缺陷,本研究将使用基因测序技术对该家系成员进行SCN9A基因突变检测,以期为该家系提供准确的遗传咨询。
【关键词】一原发性红斑肢痛症;SCN9A基因突变;家系;基因测序技术
一、研究背景
一原发性红斑肢痛症(Erythromelalgia,EM)是一种罕见的遗传性疾病,其主要表现为手脚肢体疼痛、红斑、发热等症状。该疾病患者的痛感阈值降低,接触热物质、运动以及其他生理刺激均可引起病症发作。研究表明,EM病因与SCN9A基因的突变有关,这一基因突变导致神经元的信号传递异常,从而引起痛感异常。
目前,已经发现了不同的SCN9A基因突变与EM病症的发生有关。其中,最常见的突变是p.Ile848Thr,该突变在全球范围内被广泛报道。此外,还有一些较罕见的突变已经被报道,包括p.Arg225Cys、p.Arg225His等等。
在家系遗传模式方面,EM主要表现为常染色体显性遗传,而导致疾病的基因主要位于9号染色体上。因此,遗传咨询在该疾病的病因诊断和预防方面具有重要意义。
二、研究内容
本研究将针对一原发性红斑肢痛症家系进行SCN9A基因突变检测。研究中将采用基因测序技术,对该家系成员进行SCN9A基因测序分析,以期发现SCN9A基因突变,进一步了解该基因变异与家系中EM病症的关联性。
具体研究内容如下:
1.选取家系成员
本研究将选择一原发性红斑肢痛症家系中5名代表性成员作为样本,包括2名患者和3名正常亲属。这些样本中将包括最有可能携带SCN9A突变的成员,如患者和有亲属患有EM病症的成员。
2.提取DNA
样本提取具体如下:将每个成员的外周血采样2ml,使用血液DNA提取试剂盒提取总DNA。
3.突变检测
本研究将使用基因测序技术对SCN9A基因进行突变检测。具体操作如下:
(1)对SCN9A基因进行扩增
根据SCN9A基因序列设计一对引物,利用PCR扩增该基因片段。
(2)纯化PCR产物
将PCR产物利用胶回收试剂进行纯化。
(3)基因测序
将纯化后的PCR产物进行基因测序,利用Sanger测序技术进行分析。
4.检验和分析数据
分析所得的测序数据,用VariantAnalysis软件进行分析,找出是否存在突变信号,进一步确认突变类型。
三、研究意义
本研究将为一原发性红斑肢痛症家系提供准确的基因诊断,帮助家系成员了解自身的遗传风险。同时,本研究对EM病症的病因研究提供了一些新的思路和数据,对以后的相关研究也具有重要启示作用。