双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究 毕业论文.doc
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毕 业 论 文（设计）
题 目：姓 名：
学 院： 食品科学与工程
专 业：
班 级： 200702
学 号：
指导教师：
2011年6月日
摘要 I
Abstract II
1 引言 1
1.1 双水相萃取分离技术 2
1.2 双水相形成机理 2
1.3 影响物质分配平衡的因素 2
1.4菠萝蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的萃取原理 3
1.5 论文研究的主要内容 3
2 材料与方法 5
2.1 实验材料 5
2.1.1 材料 5
2.1.2 设备 5
2.2 实验方法 5
2.2.1 双水相体系的确定 5
2.2.2 相图的绘制 5
2.2.3 蛋白标准曲线的绘制 7
2.2.4 菠萝粗酶的提取 8
2.2.5 PEG/(NH4)2SO4双水相体系的建立 8
2.2.6 双水相萃取操作方法 8
2.2.7 菠萝蛋白酶酶活测定-G.D.U法 9
3 结果与分析 10
3.1 每g菠萝下脚料中含有的菠萝蛋白酶含量及菠萝蛋白酶的活性 10
3.2 不同分子量的PEG/(NH4)2SO4体系相图的制作 10
3.3 PEG的分子量对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 13
3.4 PEG浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 14
3.5 (NH4)2SO4浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 15
3.6 外加盐NaCl浓度的不同对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 16
4 讨论 17
参考文献 18
致谢 19
双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究
摘要：是典型的巯基蛋白酶，能分解蛋白质肽酯酰胺，本文研究了不同PEG分子量、PEG浓度、(NH4)2SO4质量分数外加盐等因素对菠萝酶活分配实验表明PEG平均分子量1000，浓度1%，(NH4)2SO4浓度1%，pH为7.0，室温的情况下，其分配系数达到3.，酶活性回收率可达9%，加入一定浓度NaCl对菠萝蛋白酶活性影响，而加入MgCl2和CaCl2明显使菠萝蛋白酶活性降低。
关键词：双水相聚乙二醇菠萝酶萃取
Study on the extraction of bromelain by aqueous two-phase system
Abstract：Bromelain the acysteine ??proteinase enzyme which had the most typical and a very wide range of application. It could decompose protein, peptide, ester, amide. Aqueous two-phase extraction (ATPE) was a new technology which had the advantage of mild operation state, large capacity, continuous processes over traditional extraction in biological separation. so it could be wildly used in bio-separation engineering. The effects of aqueous two-phase system and the proportion into phase composition, operating conditions, diluting ratio on bromelain activity were studied during this paper. In PEG/(NH4)2SO4 two-phase aqueous system, the effects of the molecular weight of the PEG used, the concentrations of PEG and the mass fraction of PEG/(NH4)2SO4 and other
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