棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段对Cry1Ac增效的研究的开题报告.docx

棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段对Cry1Ac增效的研究的开题报告

一、课题背景

昆虫抗性防治是现代农业中最重要的问题之一。基因工程技术提供了新的方法来对抗昆虫害虫。棉铃虫是棉花上最主要的虫害之一，其危害严重，对棉花的影响也非常大。为了保证棉农的收成，目前已经开发出了许多具有抗棉铃虫活性的基因工程植物，其中包括Cry1Ac（Bttoxin）等。然而，由于一些昆虫对Cry1Ac的抗性，需要对Cry1Ac进行增效，才能更好地控制棉铃虫。

二、课题研究目的

本研究的目的是通过研究棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段对Cry1Ac的增效，提高Cry1Ac的抗性，以解决棉铃虫对Cry1Ac的抗性问题。

三、研究内容

1.棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段的克隆和表达。

2.利用三叉体杀死率进行体外生物活性测定，探究棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段与Cry1Ac的相互作用。

3.测定棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段对Cry1Ac的增效作用以及增效机制的研究。

四、研究意义

本研究主要是解决Cry1Ac在抗昆虫时出现的抗性问题。结果可应用于开发新的抗虫植物，或对现有转基因植物进行修饰提高其抗虫效果，实现对棉铃虫的有效防治，提高棉花产量和质量。

五、研究方法及预期成果

1.克隆棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段及构建相关质粒。

2.将构建的相关质粒转化到大肠杆菌Rosetta（DE3）中进行蛋白表达。

3.体外生物活性测定检测棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段与Cry1Ac的相互作用。

4.用ELISA和小鼠肝脏微粒体体外试验系统进行增效作用和机制的研究。

预期成果：获得棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段与Cry1Ac的增效作用机制，并应用于开发新的基因工程植物，提高棉花对棉铃虫的抗性。