人视网膜祖细胞和脑神经干细胞的体外培养和诱导分化研究.pdf

史堡眍型苤蛊!塑§生!Q旦箜丝鲞筮!Q翅堡塾垫』QP!尘逝!：Q!塑!笪!鲤!：!!!垒!。盟!：!Q ·901· ．论著． 人视网膜祖细胞和脑神经干细胞的 体外培养和诱导分化研究 康前雁刘勇 陈新林赵建军 张蓬勃 李捷 罗禹 钱亦华 宋土生 【摘要】 目的 比较人视网膜祖细胞和脑神经干细胞的体外分化潜能。方法分离8—12周 人胎儿神经视网膜和脑皮质、纹状体神经干细胞，进行无血清体外培养；采用光镜和免疫细胞化学或 荧光免疫细胞化学染色方法，分别观察在无血清和10％胎牛血清培养条件下，两种来源的神经干细 胞分化后的细胞特性。结果两种来源的神经干细胞，均能在体外有或无血清培养条件下增殖并分 化。视网膜祖细胞不但表达视网膜祖细胞标志物Pax-6，也可表达神经干细胞标志物一巢蛋白 (Nestin)、成熟神经元标志物一微管相关蛋白2(Map2)、星形胶质细胞标志物一胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、节细胞标志物Thy-1和视杆细胞标志物视紫红质(Rhodopsin)；脑神经干细胞也能表达这些 特异性细胞标志物。血清诱导分化时，视网膜祖细胞较难贴壁，贴壁细胞球伸出少而短的突起，单个 细胞形态不清；而脑神经干细胞球易贴壁并伸出较长突起交织成网，大量细胞从细胞球中沿突起徙 出，单个细胞形态清晰。结论人胎儿视网膜祖细胞和脑神经干细胞体外培养均具有向神经元、胶质 细胞及视网膜终末细胞分化的能力；两种干细胞在进行血清诱导分化时，细胞的贴壁、迁移能力及分 化后的细胞形态均存在差异。r中华腰科杂志，2006，42：901-907) 【关键词】视网膜；脑；干细胞；细胞分化；细胞，培养的 A fordi脏renfiafionbetweenhumanfetalretinal cellsandbrainneural comparisonstudy progenitor cells stem invitro KANG Qian—yan’，UUl，j昭，CHENXin-硫，Z日A0Jian-jun，Z础ⅣGPeng-bo， Ⅱ此，LUOYu，QIANM-hua，SONGTu-sheng．+DepartmentofOphthalmology，‰FirstAffiliated Hospital， Xi7an School JiaotongUniversityofMedwine．Xi’an710061．China author：LIU CorrespondingyDw，Email：liuy5599@mail．xjtu．edu．cn the ofdifferentiationofhumanfetalretinal 【Abstract】ObjectiveInvestigatingpotential progenitor brainneuralstem vitro．MethodshRPCsand were cells(hRPCs)andcells(hBNSCs)in laBNSCs isolatedfromhuman weeksof ctllturedinserum．freeDME彬F12culture fetuses(8．12gestation)and mediumwithN2 basicfibmblast supplement，epidermalgrowthfactor(EGF)andgrowthfactor(bFGF)or culturemediumwitll10％f；talbovine withoutEGFand and serum(FBS