总胡萝卜素的测定.docx

总胡萝卜素的测定（比色法）

一、原理

样品通过石油醚—丙酮（1：0.5V/V）混合液萃取，使之与非类胡萝卜素成分分离，在

451nm波长下测定萃取溶液的消光度，可以计算出食品中总胡萝卜素的含量。二、材料、仪器与试剂

（一）材料：胡萝卜、菠菜、油菜等。

（二）仪器：可见分光光度计、分液漏斗(150mL)、容量瓶（50mL）、量筒（100mL）、三角瓶（100mL）、研钵、铁架台、漏斗、铁圈。

（三）试剂：石油醚、丙酮、无水硫酸钠、石英砂、饱和氯化钠溶液。三、操作步骤

（一）样品处理：称取5g已捣碎混匀的样品置研钵内，加石油醚、丙酮（1:0.5）混合溶液10mL,石英砂少量，研磨提取，然后将提取液过滤至100mL三角瓶中。如此反复提取残渣3~4次。并过滤，直到提取液无色，将几次滤液从100mL三角瓶移至150mL梨形分液漏斗中，并用水洗涤石油醚层，出现乳化时，加饱和NaCl溶液3~5mL，剧烈振荡，待液相分层后，弃去下层水相，重复2~3次，将石油醚层定量转移至50mL容量瓶中，用无水硫酸钠过滤，以石油醚定容，摇匀。置暗处供比色用。

（二）测定：用1cm比色皿以石油醚作空白，在451nm波长处测定消光度。四、计算

以β-胡萝卜素含量计：

E×V×100×1000×1000

总胡萝卜素（μg/100g）=

E1×W×100E×50×100×1000×1000

=

2500×W×100

E

= ×20000

W

式中：E——样品在451nm波长下消光值

E1——1%β-胡萝卜素石油醚溶液在451nm波长下的消光值，即2500V——样品中总胡萝卜素石油醚提取液定溶毫升数

W——样品重量（g）