2.小吞噬实验.ppt

显微镜油镜原理 显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数 接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 表示显微镜辨析物体（两端）两点之 间距离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ?：可见光的波长（平均0.55?m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。 ?：镜口角（即入射角）。 油镜使用的原理 1. 香柏油的折射率与玻璃接近，提高了视野的照明度。 2 . 提高了显微镜的分辨率 显微镜油镜的使用方法 1.用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 2.调节光亮度 3.低倍镜观察：粗调、细调 4.依次再进行中倍、高倍观察 5.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标 本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看 清物象为止。 6.换片：另换新片，必须从第三条开始操作。 7.用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的 油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用 擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。 * 实验二 中性粒细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法 一、实验内容 1. 细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能 (小组做) 2. 录相《免疫反击战》 二、目的与要求 1.了解中性粒细胞生物学特性及其意义。 2.熟悉“细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能”试验的原理、方法及用途。 [实验原理] 中性粒细胞——来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂，靠“造血”补充； 胞核呈多叶状；胞质内有多种颗粒； 内含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、组织蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。 中性粒细胞特有，巨噬细胞没有这种酶，为中性粒细胞在细胞化学上的标志。 中性粒细胞通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤，吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物； 中性粒细胞产生伪足包围异物——吞噬体或吞噬泡； 吞噬——呼吸爆发——产生大量过氧化物及超氧化物等毒性效应分子——杀死吞噬的细菌等异物； 同时，中性粒细胞本身也死亡，成为脓细胞。 中性粒细胞： A.在抗化脓性细菌感染中起重要防御作用； B.引起感染部位急性炎症反应； C.参与超敏反应（如III型超敏反应），引起机体免疫病理损伤。 将新鲜血液和细菌混合，经合适时间后涂片染色，即能观察到被吞噬到中性粒细胞内但还未被消化掉的细菌。 检测中性粒细胞吞噬细菌的能力，可作为辅助判断机体非特异性免疫力的指标之一。 细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能 ——小吞噬实验 检测指标： 1. 吞噬百分率＝ 100个细胞中吞噬有细菌的细胞数 人吞噬百分率正常参考值：62%~76% 100 × 100% 2. 吞噬指数＝ 100个中性粒细胞吞噬的细菌总数 人吞噬指数正常参考值：1.32~1.72 100 (1)显微镜、香柏油、小试管、EP管、载玻片、酒精棉球、吸管、水浴箱等。 (2)肝素抗凝试管、瑞氏染液、双蒸水。 (3)菌液制备：白色葡萄球菌18～24小时内汤培养物，经Mc Farland比浊法调整浓度至6～9×109/mL，加热100℃ 15分钟杀死细菌，置4℃保存备用。 实验材料 (1)仔细消毒后，每个班取5ml静脉血于肝素抗凝管内（轻轻摇匀）。 实验方法 (3)取出EP管，用吸管吹打混匀后，取1滴“全血-白色葡萄球菌混合液”置于洁净载玻片上，用另一载玻片推片，制成血涂片