小鼠巨噬细吞噬鸡红细胞实验.ppt

实验目的 实验原理 仪器、材料与试剂 实验步骤 实验报告及思考题 目的要求 1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 实 验 原 理 在高等动物中，单核吞噬细胞系统和嗜中性粒细胞专司吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。单核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定和游走的巨噬细胞。 但静息的巨噬细胞其分泌和杀伤功能低下，受到病原微生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态，分泌能力得以增强，但杀伤功能仍然很低。只有活化的巨噬细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作用。 大吞噬细胞 来源： 单核巨噬细胞 存在部位： 血液（单核细胞) 全身结缔组织及小血管的基底 膜组织（巨噬细胞） 功能： 吞噬病原微生物（寄生虫等），死亡细胞。 小吞噬细胞 来 源： 中性粒细胞 存在部位： 血液 、 炎症部位（全身） 功 能：主要吞噬化脓菌 三、实验用品 1．器材 显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸 2．试剂 生理盐水、Alsever溶液、瑞士染液 3．材料 小白鼠、1%鸡血红细胞。 四、实验步骤 实验前3天取小白鼠腹腔注射6％淀粉液1毫升（连续注射三天效果较好）。 1．小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液2ml，轻揉腹部使鸡细胞分散。 2 ． 25～30分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。并腹腔注射生理盐水2毫升 3.在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，腹腔巨噬细胞贴壁，弃去生理盐水，待其标本稍干后瑞氏染液染色。 4.瑞氏染色：滴加3~4滴瑞氏染液于标本上，以完全盖住标本为宜。 5分钟后甩去玻片上的染液，自来水轻洗，吸水纸吸干。 干燥后油镜镜检 5. 清洗油镜，解剖盘及器具，打扫桌面卫生、实验室卫生，老鼠尸体要掩埋！ 实 验 报 告 及 思 考 题 实验报告 1.画图示出你所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬羊红细胞的各种形态。 2.计算吞噬百分比，即每一百个吞噬细胞中吞有羊红细胞的吞噬细胞数。 思考题 1.在高等动物中哪些细胞具有吞噬功能？ 2.在什么情况下巨噬细胞吞噬功能加强？ 未被吞噬的鸡红细胞 吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞