试验三小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬现象备课笔记.DOC

蚌埠医学院教师备课笔记 授课对象 授课时间 年 月 日 教 学 内 容 备 注 导语： 我们已经知道，白细胞包括粒细胞，单核细胞和淋巴细胞三大类，而其中，粒细胞和单核细胞的吞噬活性较强，因此，这两类细胞称为吞噬细胞。血液中的单核细胞是巨噬细胞的前身，它在血液中停留1-5天以后，穿出血管进入到组织和体腔当中，分化成巨噬细胞，具有活跃的变形运动、明显的趋化性和一定的吞噬功能。 实验三 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬现象 一 实验目的 1.掌握小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬现象原理和过程。 2.掌握小鼠腹腔注射给药和脱颈椎处死方法。 3.掌握临时细胞制片的制作与观察方法。 二 实验原理 在单细胞动物中，吞噬是作为摄取营养物质的一种主要方式而出现的。在高等动物中，吞噬是一种非特异性的免疫防护机制。当病原微生物或者其他异物侵入机体的时候，巨噬细胞在趋化因子的作用下，成为游走的巨噬细胞，由于趋化性会向异物处聚集，然后伸出伪足包围异物，并发生内吞作用，形成吞噬泡，将异物内吞入细胞质中，继而，溶酶体和吞噬泡融合，最终将异物消化分解。 同时，巨噬细胞的吞噬实验也被用作衡量机体免疫功能的一项重要指标。比如在正常情况下，巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分率为61.39%~64.15%，而恶性肿瘤病人的吞噬百分率通常却在45%以下，同样，吞噬指数也很低。当手术切除肿瘤，或者通过放疗、化疗病情好转时，吞噬率以及吞噬指数都会回升，所以在肿瘤的疗效判断中巨噬细胞的吞噬实验是一项重要的参考指标。可以用来分析判断机体的免疫水平。 三 实验器材（课堂展示） 总结以往所学导入新课 讲授 结合临床实例激发学生兴趣 蚌埠医学院教师备课笔记 授课对象 授课时间 年 月 日 教 学 内 容 备 注 四 实验步骤 1．实验前1天小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝），诱导小鼠吞噬细胞渗出。 2．小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹部使鸡细胞分散。 3．20min后，将小白鼠颈椎脱臼处死。 4.打开腹腔，用吸管吸取腹腔液，滴1滴在载玻片上，盖上盖玻片，镜检。 提问：为什么要在前一天注射淀粉肉汤？ 注意：示教过程中讲解小鼠腹腔给药、颈椎脱臼处死及解剖的注意事项 五 实验结果与分析 （1）视野中可见细胞类型及其特征： 在高倍镜下，首先能够辨别出鸡红细胞和巨噬细胞。鸡红细胞略呈淡黄色、椭圆形且有细胞核，而数量较多的，呈圆形或不规则形的较大的细胞为巨噬细胞，其典型的形态特征为细胞表面具有许多像毛刺一样的小突起，为巨噬细胞活化后的伪足 （2）不同吞噬阶段的巨噬细胞形态：慢慢移动载玻片，在视野中还可以发现处于吞噬过程不同阶段的各类巨噬细胞和鸡红细胞。有的巨噬细胞已经将1至数个红细胞部分吞入；将不同吞噬阶段的巨噬细胞形态动态的连贯起来，就能够绘制出吞噬作用的全过程。有的巨噬细胞已经吞入了1个或者几个红细胞并在细胞质中刚刚形成椭圆形的吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬细胞体积缩小，并呈现出圆形，这是与初级溶酶体发生融合，泡内物正在被消化分解。 六 讨论： 1、为了获得良好的实验结果，在实验过程中需要注意哪些操作？ 2、了解非特异性免疫机制的基本内容。 示教 结果观察