蜂蜜中DNA的荧光定量PCR鉴别方法研究与应用.docx
蜂蜜中DNA的荧光定量PCR鉴别方法研究与应用
目录
蜂蜜中DNA的荧光定量PCR鉴别方法研究与应用（1）．．．．．．．．．．．．．．4
一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
（一）蜂蜜的真伪鉴别问题现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
（二）荧光定量PCR技术在食品检测中的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．5
（三）研究的重要性与预期目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
二、蜂蜜样本的采集与预处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
（一）样本选择及来源分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
（二）样本的采集方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
（三）样本的保存与预处理流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
三、DNA提取技术研究与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
（一）DNA提取原理及常用方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
（二）蜂蜜样本中DNA提取的难点分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
（三）DNA提取技术的优化策略及实验步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
四、荧光定量PCR鉴别方法的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
（一）荧光定量PCR技术原理及特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
（二）PCR引物与探针的设计原则及筛选过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
（三）荧光定量PCR反应体系的建立与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
五、蜂蜜中DNA荧光定量PCR鉴别方法的验证与应用．．．．．．．．．．．．．．19
（一）实验材料的准备与分组．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
（二）鉴别方法的操作流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
（三）结果分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
（四）方法的推广与应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
六、蜂蜜中常见掺杂物质的DNA分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
（一）常见掺杂物质及其DNA特征分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
（二）针对掺杂物质的PCR鉴别实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
（三）实验结果与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
七、实验数据的处理与分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
（一）数据采集与记录方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
（二）数据处理软件及工具介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
（三）数据分析流程与方法选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
蜂蜜中DNA的荧光定量PCR鉴别方法研究与应用（2）．．．．．．．．．．．．．35
内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
蜂蜜中DNA的提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
2.1DNA提取方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
2.2DNA纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
2.3提取与纯化效果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
荧光定量PCR原理与技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.1荧光定量PCR基本原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．