健康人外周血树突状细胞的体外诱导及其功能分析.pdf

·482· 自查痘：鲞里堕垫!!堡!旦箜兰Q鲞筮!塑』塑翌坐生￡些!!世!鱼L型吐塑塾叁!匙塾垫!!：!堂：垫：盥!：§ ·论著· 健康人外周血树突状细胞的体外诱导 及其功能分析 许莲蓉冯江芳牛勃胥显民杨波 【摘要】 目的分析以健康人AB血清与dIcD舰体外诱导健康人外周血树突状细胞(Dc)的功 能。方法对健康入外周血单个核细胞进行体外培养，在以健康人AB血清为基础的培养体系中加入粒 细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM．csF)、重组人白细胞介素(rhIL)4、dlcD。等细胞因子，诱导单个核 细胞分化形成Dc，采用倒置显微镜及瑞特．吉姆萨染色观察，流式细胞术行DC表型鉴定，四甲基偶氮唑 蓝比色(M．I’I)法进行混合淋巴细胞反应(MLR)，检测其抗原刺激能力，酶联免疫吸附(ELIsA)法检测 d后的细胞具有典型的Dc形态，并上调表达DC特征性表面 DC培养上清lL广12的分泌。结果培养7 分子cD。及共刺激分子CD∞、cD。CD衡，第O、l、3、5、7天，5个时间点间CD小CD蚰、cD叭cD蚧cD．。表达 可较强地刺激同种自体淋巴细胞增殖，GM．csF加rhIL4、rhCD蛔．组较GM．csF加rhIL4组刺激反应能力 强。培养的DC自培养第5天始即有IL广12分泌，未加cD棚，组IL广12p40分泌量为(42．92±1．54)pg／IIll， 加cD蚵．组为(136．18±5．27)pg／IIIl；培养第7天，ILl2p40分泌明显增多，两组分别为(60．09± 2．27)pg／IIIl及(322．30±3o．60)pg／ml，差异有统计学意义(f=—44．94l、一22．61I，均Po-05)。结论健 康人外周血单个核细胞可在以健康人AB血清与rIlcD札为主的培养体系中诱导成Dc。 【关键词】树突状细胞；髓性，白血病，急性；正常人AB血清；r}IcD40L 0fdendri廿cce№fnm bloodoftlIe ind嗽ediⅡvitro F哪cti伽Ial彻lalysis peripheral hemthy髀opIe xu yAⅣG肋． 2，ld xu￡洳一ro妒，府，vG．腼峨扁哆Ⅳ，U酰 x泐-m溉 8Dep酬榭m矽He，枷。如彩 日osp删矿S概i胁如以‰西e，s咖蹦脚D3000J，魄i嬲 co册叩D础，lg删b开肋￡洳-ro，lg；踟融菇旃蝴口，曙协D^“砌，l Toestablishamethodtoinducedendriticceus 如m blood 【Abstract】objective (Dc) peripheral 8enlmin“tm粕dto tlle mono咖cle盯cellsof inno瑚alhumanAB andthe healthypeople iden“fypheIlotype 亿nctionof b100d瑚nonuclear werecultu陀din DC．Memods cells(PBMNC)0f Peripheral healtIlype叩le RPMI1640media for7 to hum锄AB眙mm，GM．CSF，dlIL4and／nod1CD辄J day8generateDC， including tlle to T wh