孔雀石绿与蛋白质相互作用的电化学行为的研究 .pdf

第 31卷第 1期 彭贞等 ：孔雀石绿与蛋 白质相互作用的电化学行为的研究 49 化学试剂，2009，31(1)，49～51 孑L雀石绿与蛋 白质相互作用的电化学行为的研究 彭 贞 ，郑钰琴 (巢湖学院 化学与材料科学系，安徽 巢湖 238000) 摘要 ：在 pH4．7的NaAc—HAc缓冲液 中，孔雀石绿(MG)能与牛血清 白蛋 白相互作用形成复合物 ，使孔雀石绿在 一0．72V (vsSCE)处有一极谱还原峰峰电流下降，在最佳条件下，峰电流的下降值同牛血清 白蛋 白(BSA)的浓度在 0．5～20mg／L范 围内呈线性关系，其线性 回归方程为 △ (nA)=一4．78+41cBsA(mg／L)，相关系数 r=O．996(n=10)，检出限为 O．4mg／L。 可将该方法应用于血清样品的测定 ，结果满意。 关键词 ：牛血清 白蛋 白；孔雀石绿 (MG)；线扫极谱法 中图分类号：0646 文献标识码 ：A 文章编号：0258．3283(2009)01．0049．03 蛋白质属于生物有机大分子 ，是决定生命存 为工作电极、饱和甘汞 电极 (vsSCE)为参 比电极、 在和运动的最重要的一类物质 ，它在构成有机体 铂丝电极为对电极 ，成都仪器厂)；pHS一25型酸度 和完成体 内精确的生化代谢和机体多样的生理功 计 (上海雷磁仪器厂)。 能中发挥着重要的作用。蛋白质的定量测定在临 400mg／L牛血清 白蛋白(BSA，上海伯奥生物 床医学和生命科学的研究中起着重要的作用。 目 科技有限公司，相对分子质量 以65000计)，4oC 前蛋白质定量分析 的方法很多，主要的有基于染 冰箱冷藏 ；400mg／L溶菌酶 (Lyso，上海伯奥生物 料 蛋白质结合及金属离子一染料 蛋白质结合的光 科技有限公司)，4℃冰箱冷藏 ；1×10～nlo1／L孔 谱分析法、荧光分析法和共振光散射法等。蛋 白 雀石 绿 (Malachitegreen)标 准 溶液 ；0．2mol／L 质与有机染料小分子 、金属离子 、药物小分子等相 NaAcHAc缓冲液。实验用水为 3次蒸馏水，所用 互作用的研究已有不少报道，多采用光度法_14J， 试剂均为分析纯。 利用电化学法研究有机小分子与蛋 白质相互作用 1．2 实验方法 及其分析应用的也有报道_5IoJ。电分析化学法具 在 10mL比色管 中，依次加入 3．0mL(pH 有高灵敏度和高选择性 ，并且它不会受到传统生 4．7)0．2mol／L的 NaAc．HAc缓冲液、0．3mL的 物样品中的混浊 、黄疸等颜色的干扰 ，近年来在生 1×10 mol／L的孔雀石绿 (Malachitegreen)溶液 命科学领域 中得到 了广泛 的应用 。孑L雀石绿 和一定量的BSA，用水稀释至刻度 ，摇匀静置 10 (Malachitegreen)是一种有机染料 ，常用作生物染 min后用电化学方法进行研究和测定。 色剂 ，属于三苯基 甲烷型染料，也曾是渔业常用的 水体消毒和防治鱼病的染料杀菌剂 ，但其化学官 2 结果与讨论 能团三苯甲烷有致癌作用 ，我国农业部 已将其列 2．1 循环伏安图的变化 入禁用药物清单 ，禁止用于所有的供人食用的动 在 pH4．7的NaAc—HAc缓冲液 中，孔雀石绿 物 ，所 以研究蛋 白质和孑L雀石绿之间的相互作用 有 灵敏的不可逆还原峰(图 1曲线 1)，当加入 将有助于人们了解 MG在人体内所引起 的致癌作 BSA后 ，孔雀石绿还原峰峰电流明显下降(图 1曲 用。在研究中