褪黑素对试验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制.PDF

安徽医科大学学报　ＡｃｔａＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＭｅｄｉｃｉｎａｌｉｓＡｎｈｕｉ　２０１７Ｄｅｃ；５２（１２） ·１７４７· 网络出版时间：２０１７－１０－１６９：２０　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０６５．Ｒ０９２０．００１．ｈｔｍｌ ◇基础医学研究◇ 褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔心脏的 保护作用及其可能的分子机制 余　沛，王　雪，王　怡，周　青，汪　渊，朱华庆 摘要　目的　观察褪黑素（ＭＬＴ）对实验性动脉粥样硬化兔 病、心肌缺血以及心肌肥大等，但其发病机制复杂， 心脏的保护作用及其可能的分子机制。方法　普通级纯种 有待于进一步研究［１］。褪黑素（ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，ＭＬＴ）是 新西兰大耳白兔随机分为３组，正常组：饲喂普通饲料；模型 ［２］ 一种内源性分泌吲哚类物质 ，主要由哺乳类动物 组：饲喂高脂饲料（普通饲料＋１％胆固醇＋５％猪油）；褪黑 和人类松果体分泌，具有很强的抗氧化作用，可抑制 素组：饲喂高脂饲料的同时ＭＬＴ灌胃１０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）治疗。 ［３］ 平滑肌细胞迁移炎症的发生等 。肌球蛋白轻链 纯种大耳白兔适应性饲养一周后，采用高脂饮食诱导造模， 激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）是一种重要 同时给予褪黑素药物治疗。于１２周后处死进行采血，检测 ［４］ 血清中血脂等指标。取动脉进行油红染色，检测脂质斑块形 的肌动蛋白调节因素，研究 显示动脉粥样硬化病 成情况；取心脏组织，包埋后 ＨＥ染色观察心肌组织的形态 程中ＭＬＣＫ可以在１９位丝氨酸和１８位苏氨酸上磷 变化；Ｍａｓｓｏｎ染色检测心肌组织中胶原纤维的变化；Ｗｅｓｔｅｒｎ 酸化肌球蛋白轻链（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ，ＭＬＣ），导致 ｂｌｏｔ法检测ｐ３８／丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通路相关蛋 肌球蛋白构象发生变化形成张力纤维，引起内皮细 白及肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）、肌球蛋白轻链（ＭＬＣ）、肌 胞骨架重排，导致动脉内膜屏障完整性被破坏，脂质 球蛋白轻链磷酸化（ｐＭＬＣ）的表达水平。结果　动脉油红 ［５］ 更易沉积 。该实验通过观察褪黑素对动脉粥样 染色结果显示模型组出现大量脂质斑块，证明造模成功。血 硬化兔心肌组织结构的影响及对 ＭＬＣＫ蛋白的影 脂结果显示模型组总胆固醇（ＴＣＨ）、三酰甘油（ＴＧ）浓度明 响，探讨褪黑素对动脉粥样硬化心肌损伤的保护作 显上升，而褪黑素组相对模型组下降。油红染色ＨＥ染色结 用及其可能的分子机制。 果显示ＭＬＴ能改善心肌组织形态的紊乱情况，Ｍａｓｓｏｎ染色 结果显示 ＭＬＴ能缓解心肌组织胶原纤维的堆积。Ｗｅｓｔｅｒｎ １　材料与方法 ｂｌｏｔ结果显示ＭＬＴ能下调ｐ３８的磷酸化水平以及 ＭＬＣＫ蛋 白的表达水平，以及下调 ＭＬＣ的磷酸化表达水平（Ｐ＜ １．１　主要仪器　酶标仪（ＴｈｅｒｍｏＭｕｌｔｉｓｋａｎＧＯ）、低 ００５）。结论　ＭＬＴ可能通过降低 ＭＡＰＫ通路中相关蛋白 温离心机（Ｌｅｇｅｎｄｍｉｃｒｏ２１Ｒ）（美国ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公 ｐ３８的磷酸化调控 ＭＬＣＫ蛋白的表达，从而降低 ＭＬＣ的磷 司）；大制冰机（ＡＦ１００，意大利 ＳＣＯ