植物组织与器官培养.ppt

胚培养技术依据所剥离胚的发育时期不同：培养类型幼胚培养(immatureembryo)成熟胚培养(matureembryo)子叶形成之前子叶形成之后第64页,共89页，2024年2月25日，星期天胚培养技术成熟胚培养成熟胚珠合点珠心珠被珠柄珠孔胚囊第65页,共89页，2024年2月25日，星期天胚培养技术成熟胚培养：指子叶期至发育成熟的胚培养。成熟胚是自养的，培养基需要简单。仅提供一定的温度、湿度就可以发芽生成植物体。如种子的发育。培养过程：种子——95%酒精消毒——选取完好种子——70%酒精浸数秒——0.1%升汞或10%次氯酸钠浸泡——无菌水冲洗——种子培养几天——剥离种胚——接种在培养基上。成熟胚培养一般较易获得成功。第66页,共89页，2024年2月25日，星期天胚培养技术--成熟胚培养第67页,共89页，2024年2月25日，星期天牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖第68页,共89页，2024年2月25日，星期天胚培养技术--幼胚培养：是指处于原胚期、球形期、心形期、鱼雷期的胚培养；幼胚完全是异养的，离体条件下培养要求培养基成分复杂，培养不易成功。幼胚培养的基本程序取子房常规表面消毒解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚固体培养第69页,共89页，2024年2月25日，星期天黄瓜幼胚培养第70页,共89页，2024年2月25日，星期天影响幼胚培养成功的因素培养基：无机盐、碳水化合物、激素等环境条件(温度：多数为25-30℃，因植物种类有所差别。光照：一般认为黑暗或弱光条件较为合适。)提高幼胚的成活率，可采用胚乳看护培养。第71页,共89页，2024年2月25日，星期天胚龄与胚性发育的关系胚龄越小，离体培养越困难；胚的发育分为自养期和异养期；第72页,共89页，2024年2月25日，星期天胚乳培养胚乳培养（Endospermculture）：是指将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术。被子植物胚乳是由2个单倍的极核和1个单倍的精子结合而成的3倍体组织。由它可获得无子结实的3倍体植株，进而可将它加倍成6倍体植株。第73页,共89页，2024年2月25日，星期天1.胚乳离体培养的意义胚乳培养再生植株证明了全能性理论；研究胚和胚乳的关系及胚乳组织的功能；再生植株多为三倍体，产生无籽果实；可以从胚乳愈伤中分离和筛选各种类型的非整倍体植株。胚乳细胞是研究淀粉、蛋白质和脂类天然产物代谢途径的理想系统。第74页,共89页，2024年2月25日，星期天2.胚乳培养技术胚乳培养过程含胚乳的果实或种子→表面消毒→无菌条件下胚乳的剥离→接种培养基培养培养室温度25-27℃，黑暗或弱光下第75页,共89页，2024年2月25日，星期天影响植物胚乳培养的主要因素基因型：胚乳是一种独特的组织，在被子植物中它是双受精的产物，在倍性上属于三倍体，事实上我们培养胚乳的首要目的也是为了直接获得三倍体植株。胚乳的发生类型和发育程度：胚乳处于细胞形成期并仍保持旺盛分生能力。（游离胚乳核时期和成熟胚乳时期均不适合）。培养基第76页,共89页，2024年2月25日，星期天胚乳培养技术胚乳培养的器官发生愈伤组织形成、器官发生（1）愈伤组织的诱导（2）愈伤组织的再分化（3）胚乳苗的生根培养第77页,共89页，2024年2月25日，星期天胚珠和子房培养柱头花柱子房花梗花托花组成胚囊卵细胞株心珠孔反足细胞珠被胚珠极核株柄第78页,共89页，2024年2月25日，星期天第79页,共89页，2024年2月25日，星期天1.胚珠培养和子房培养的意义胚珠培养的意义:防止杂种胚早期败育，获得杂种植株；受精前胚珠培养，可作为试管受精的基础；未受精胚珠培养，能培养获得单倍体植株，用于单倍体育种子房培养的意义:获得杂种植株；未授精子房培养为试管受精提供技术基础；未受精子房培养能获得获得单倍体植株，用于单倍体育种第80页,共89页，2024年2月25日，星期天2.胚珠培养和子房培养的技术胚珠培养：将胚珠从母株中分离出来，放在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长发育，以致形成幼苗的过程。根据胚珠是否受精分为两类：受精胚珠的培养未受精胚珠的