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两种红景天根中主要化学成分提取工艺及含量测定研究的中期报告
根据研究目的,我们选取了两种红景天根,即药材市场上常见的大红景天和小红景天根,进行主要化学成分提取工艺及含量测定的研究。
1.大红景天根的主要化学成分提取工艺
(1)准备样品:将大红景天根去泥洗净,晾干;
(2)粉碎样品:将晾干的大红景天根粉碎成粉末状;
(3)提取:将大红景天根粉末与70%乙醇按1:20(w/v)比例加入圆底烧瓶中,冷浸提取48小时,每12小时搅拌一次;
(4)过滤:用过滤纸过滤提取液,滤液收集于锥形瓶中;
(5)蒸发:将滤液置于水浴上蒸发至干燥;
(6)称重:将干燥的提取物称重,记录其重量;
(7)计算提取率:按照以下公式计算大红景天根提取物的提取率:
提取率(%)=提取物重量/样品重量×100%
2.大红景天根的主要化学成分含量测定
(1)对比实验法:用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)分别测定大红景天根提取物中总黄酮和总皂苷含量;选择大红景天根提取物为实验组,使用纯天然大红景天根为对照组。
(2)仪器仪表:HPLC-UV分析系统、电子天平、恒温水浴器、光度计等。
(3)实验步骤:
①预处理样品:将大红景天根提取物和对照组红景天根经过超声波处理5分钟后,离心10分钟,取上清液。
②HPLC-UV分析:分别为大红景天根提取物和对照组红景天根上清液进行HPLC-UV分析,获取其总黄酮和总皂苷的峰面积。
③计算含量:通过标准曲线计算实验组和对照组的总黄酮和总皂苷含量,并进行比较。
3.小红景天根的主要化学成分提取工艺
(1)准备样品:将小红景天根去泥洗净,晾干;
(2)粉碎样品:将晾干的小红景天根粉碎成粉末状;
(3)提取:将小红景天根粉末与乙酸-乙酯(1:1)按1:20(w/v)比例加入圆底烧瓶中,加热回流提取4小时;
(4)过滤:用过滤纸过滤提取液,滤液收集于锥形瓶中;
(5)蒸发:将滤液置于水浴上蒸发至干燥;
(6)称重:将干燥的提取物称重,记录其重量;
(7)计算提取率:按照以下公式计算小红景天根提取物的提取率:
提取率(%)=提取物重量/样品重量×100%
4.小红景天根的主要化学成分含量测定
(1)对比实验法:用气相色谱-质谱法(GC-MS)对小红景天根提取物中的香豆素、酚酸和萜类化合物进行测定,使用小红景天根粉末为对照组。
(2)仪器仪表:GC-MS分析系统、电子天平、恒温水浴器、离心机等。
(3)实验步骤:
①预处理样品:将小红景天根提取物和对照组小红景天根粉末分别加入甲醇,离心10分钟,取上清液。
②GC-MS分析:将样品的上清液注入GC-MS分析系统,记录各化合物的峰面积。
③计算含量:通过标准曲线计算实验组和对照组中各化合物的含量,并进行比较。
中期报告中,我们成功实现了大红景天根和小红景天根的主要化学成分提取工艺并进行了含量测定,为后续的研究工作提供了基础数据。