第十章甾类激素药物讲课.ppt

发酵工程的基本技术过程 * ①氢化可的松的生产工艺 * ②氢化可的松生产工艺流程 以皂素为起始原料，经裂解、氧化、水解、环氧化、沃式氧化、开环、上 溴、碘代、置换等一系列化学合成，得到甾环21-醋酸酯（化合物RSA），以化合物RSA作为发酵的底物，经过微生物的生物转化反应，在甾环的11β -位引入羟基后，形成氢化可的松。 * ③氢化可的松生产工艺流程及主要工艺参数 茄子瓶 28℃,5d 孢子悬浮液 1%接种量 种子培养基 种子培养 28 ℃，0.06MPa 250r/min,25M3/h,19-21h 发酵培养基 发酵培养 10%接种量, 28 ℃，0.06MPa 160r/min,40-60M3/h,12-13h 底物RSA 溶解罐 氧化反应 28 ℃，160r/min,周期30-40h, 40-150M3/h 离心过滤 发酵液 粗品 提取 醋酸异丁酯(7:1) 氢化可的松粗品 分离 甲醇和二氯甲烷(14:86) 氢化可的松精品 结晶,精制 乙醇,活性炭 干燥 氢化可的松 成品 * 种子标准：菌丝量1/3-1/2，种龄19-21h，在试管中下沉（5min），呈芝麻粒状, pH4.1-4.6 左右，镜检无杂菌 发酵菌体标准：菌丝体积占1/2-2/3，pH3.8，菌龄12-13h，镜检菌体生长良好, 无杂菌 氧化过程：转化周期30-40h，过程检测 放罐标准：pH6.4-7.0，H2SO4显色 1级 成品标准：外观白色或几乎白色，熔点≥ 208℃，干燥失重≤1.0%， 比旋度+162 °-169°，含量≥98.5% 培 养 基： 种子培养基: 玉米浆1.25%,酵母膏0.23%,硫酸铵0.3%,葡萄糖1.05%；pH6.4-6.7 发酵培养基: 玉米浆1.20%,酵母膏0.25%,硫酸铵0. 5%,葡萄糖1.05%; pH6.4-6.7 底物投料方式：填加有机溶剂-乙醇 RSA:工业酒精（80%-85%）=1：18 注意：回流溶解，加热过猛不利于底物溶解和生物转化 ④氢化可的松生物转化工艺主要控制要点 * 氧化级别的比色分析： 底物RSA+H2SO4(浓) 肾上腺皮质酮（红色） 氧化级别分：0、1、2、3、4、5六级。 生产菌种： 蓝色犁头霉(Absidia coerulea)：转化率70%，分离率69-71%，收率45-50%. 新月弯孢霉(Curvalaria lunata)：转化率80-93%，收率55-60%. 发酵液的TLC图谱： (2)醋酸泼尼松的生产工艺 * 英文名：Prednisone?Acet