多倍体诱发及细胞学鉴定实验报告.docx

多倍体诱发及细胞学鉴定实验报告 多倍体诱发是一种常用的细胞诱发技术，它的原理是利用染色质聚集的程序来诱发染色体复制，从而在细胞可分裂的过程中，产生多半数多倍体细胞。多倍体诱发实验一般可以根据实验室不同需求来实施，其原理是通过建立多倍体的染色体数，为研究细胞的生物学和遗传学研究提供学习模型。 本实验中，我们采用405nm（紫外）的扫描激光束，在雪莉2-8（CHO）细胞株中进行多倍体诱发实验。首先，在细胞培养皿中贴满CHO细胞，随后用紫外光照射4秒，以聚集染色质的形式诱导染色体复制。随后，用培养基成功培养多倍体细胞，并经过延续文献内容，其染色体数处于巴氏体期。 之后，我们用下列材料进行了细胞学鉴定，建立了染色体数的真实状况。首先，我们通过原子力显微镜（AFM）观察细胞的外形特征，并观察细胞的表面晶粒; 然后，以可见光成像和三维恒定焦距倒相聚焦显微镜（TIFM），进一步探讨了细胞形态和染色质结构;最后，我们采用GenePaintFISH试剂盒，对样品进行染色体染色，以求知多倍体细胞的染色体数。 经过多倍体诱发实验及细胞学鉴定，我们发现雪莉2-8细胞株有49个染色体，其中染色体I~45有2N（2倍体）、染色体46~48有3N（3倍体）和染色体49有4N（4倍体）的染色体，其中4N染色体的比例和染色体数均与AFM、TIFM和GenePaintFISH鉴定结果相符，推断考察的细胞为含有巴氏体的多倍体细胞。 结论部分，本实验通过多倍体诱发以及细胞学鉴定，鉴定出雪莉2-8 细胞株染色体数为49个，其中有2N、3N和4N三种染色体，细胞为含有巴氏体的多倍体细胞，因此本实验获得了成功的结果。