NRP1对非小细胞肺癌放射敏感性的影响.doc

  NRP1 对非小细胞肺癌放射敏感性的影响# 董娟聪，张海芹，高辉，韩海玲，孟可，金顺子** （吉林大学公共卫生学院,卫生部放射生物重点实验室） 5 10 15 20 25 30 35 40 摘要：目的：探讨 NRP1 与不同种类非小细胞肺癌细胞株放射敏感性的关系，并筛选辐射抗 性最强的细胞株，以便进一步研究 NRP1 在非小细胞肺癌产生辐射抗性中的作用机制。方法： 通过 Western blot 技术检测不同来源的 5 种人非小细胞肺癌细胞株(H358、H460、H1299、 A549、SK-MES-1) NRP1 的基础表达水平，使用深部 X 光机对 5 株细胞进行不同剂量照射， 通过 MTT 实验比较肿瘤细胞的辐射敏感性，初步筛选辐射敏感性最高与最低的 2 种细胞； 进一步采用克隆形成实验、划痕实验及流式细胞术分别检测细胞存活分数、迁移能力及凋亡 率的变化，分析 2 种细胞克隆形成能力、迁移及凋亡率与细胞放射敏感性的关系，并采用 Western blot 检测照射后 2 种细胞 NRP1 的表达变化。结果：5 种肿瘤细胞 NRP1 表达量 由高到低依次为：A549 SK-MES-1 H358 H460H1299；X 射线对肿瘤细胞的抑制能力随 着照射剂量的增加而增强，其抑制率由强到弱依次为：H460 H1299 H358 SK-MES-1 A549，因此选取 A549 细胞和 H460 细胞做后续研究。克隆形成实验显示，A549 在 2 Gy 照射下的存活分数（SF2）是 0.8872，而 H460 细胞为 0.3134。X 射线对 A549 的迁移抑制 力弱于 H460，10 Gy X 射线作用后 H460 细胞的凋亡率明显高于 A549 细胞，并且受照后 A549 细胞 NRP1 的表达量上调。结论：在非小细胞肺癌细胞中 A549 的辐射敏感性最弱， 且辐射抗性的形成可能与 NRP1 表达上调有关。 关键词： NRP1；非小细胞肺癌； A549；放射敏感性；辐射抗性 中图分类号：R811.5 Efects of NRP1 on radiosensitivity of non small cell lung cancer DONG Juancong, ZHANG Haiqin, GAO HUI, HAN Hailing, MENG KE, JIN Shunzi (Key Laboratory of Radiobiology, Ministry of Health,Jilin University) Abstract: Objective: To explore the relation of NRP1with the radiosensitivity of different types of non-small cell lung cancer. Methods: The expression of NRP1on the cells of H358、H460、H1299、 A549 and SK-MES-1was detected by Western blot .MTT was used to detect cell proliferation, and selected two cells which were the highest and lowest radiosensitivity ;The SF、Migration and apoptosis rate was detected with Clonogenic assay, wound healing assay and flow cytometry respectively. Results：The expression levels of NRP1 in the five cell lines (A549 SK-MES-1 H358 H460 H1299) were all increased by degrees in order．The radiosensitivity of five NSCLC cell lines were showed a dose-dependent decrease (A549SK-MES-1H358 H1299 H460).According to the levels of NRP1and the radiosensitivity, we selected A549 cells and H460 cells to study deeply. The values of survival fraction at 2 Gy （SF2）were 0.8872 in A549 cells， 0.3134 in