从而得到多态性标记RFLP(限制性片段长度多态性) Principle for RFLPs.PPT
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英文缩写
;DNA 从哪里来?;Agarose Gel Electrophoresis ;Agarose Gel Electrophoresis;Polyacrylamide Gel Electrophoresis ;DNA片段的观察;DNA Visualization Technique—Silver Staining ;DNA Silver Staining;Fluorescence Staining;Isotope Labeling ;*;全称: Restriction Fragment Length Polymorphism
by Botstein(1980)
基本原理:物种的基因组DNA在限制性内切酶作用下,产生相当多的大小不等的片段,用放射性同位素标记的DNA作探针,把与被标记DNA相关的片段检测出来,从而得到多态性标记
;Principle for RFLPs;Procedures for RFLPs;高质量DNA提取
DNA酶切、电泳、转膜、固定
探针制备、标记
预杂交、杂交
洗膜、压片、显影
膜再生
;限制性酶切:取10—15微克DNA,加入约5U于最适温度下保温12—18小时。;转膜
探针标记
杂交
洗膜
放射自显影;Example of RFLP in Citrus;Type of pm in RFLP Markers ;RFLP标记的优缺点
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