分子生物学简答题资料.doc

第二章 1、DNA二级结构的特点？ 答：（1）DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的（2）DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧. 阐述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验？ 答：用普通培养基（含14N的氮源）培养15N标记的大肠杆菌，经过一代后，所有DNA的密度都在15N-DNA和14N-DNA之间，即形成了一半15N和一半14N的杂合分子，两代后出现等量的14N分子和14N-15N杂合分子。若再继续培养，可以看到14N-DNA分子增多，说明DNA分子复制时均可被分成两个亚单位，分别构成子代分子的一半，这些亚单位经过很多代复制仍然保持着完整性。 描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用？ 答：该酶被认为在切除由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要的作用，它也可用以出去冈崎片段5，端RNA引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。 DNA的损伤原因是什么？ 答：DNA的损伤分自发性损伤、物理因素引起的DNA损伤、和化学因素引起的DNA损伤.自发性损伤是由于DNA复制中的错误和碱基的自发性化学变化造成DNA的损伤.物理因素引起的DNA损伤常是缘于紫外线引起的DNA损伤和电离辐射引起的DNA损伤.化学因素引起的DNA损伤是突变剂或致癌剂对DNA的作用,包括烷化剂对DNA的损伤和碱基类似物对DNA的损伤.（1）原核为单复制起点,真核为多复制起点（2）原核复制子大而少,真核复制子小而多（3）真核复制起始受许可因子的控制 （4）真核复制叉移动的速度快,原核速度慢（5）真核冈崎片段小,原核大（6）真核复制存在端粒和端粒酶（7）真核原核DNA聚合酶种类,结构,作用上有差异（8）真核生物DNA复制的起始需要起始原点识别复合物（ORC）参与(1)该分子有多长？（2）该DNA有多少转？ 1）该分子有多长？答：1碱基=330Da，1碱基对=660Da 碱基对=2.5×109/660=3.8×106 kb 染色体DNA的长度=3.8×106/0.34=1.3×106nm=1.3mm （2）该DNA有多少转？ 答：转数=3.8×106×0.34/3.4=3.8×105 转座作用机理及遗传学效应？ 答：作用机理：转座可被分为复制型和非复制型两大类。顾名思义，在复制性转座中，整个转座子被复制了，所移动和转座的的仅仅是原转座子的拷贝。转座酶和解离酶分别作用于原始转座子和复制转座子。TnA类转座主要是这种形式。与此相对应，在非复制型转座中，原始转座子作为一个可移动的实体直接被移动，IS,Mu及Tn5等都以这种方式进行转座。 遗传效应：转座引入插入突变 （P65） 转座引起新的基因 转座产生的染色体畸变 转座引起的生物进化 请解释与DNA复制有关的两个术语：进行性和忠实性。在E.coil DNA复制过程中，哪些蛋白质或酶能够增强DNA复制的进行型和忠实性？ 答：进行性是指DNA聚合酶沿着DNA模板所能移动的最大距离，即合成DNA分子的长度。DNA聚合酶Ⅲ的β钳确保DNA复制的进行性。 忠实性是衡量DNA聚合酶合成子代DNA分子的准确度，DNA聚合酶Ⅲ的3，→5，核酸外切酶校正功能确保DNA复制的忠实性。 11.试述DNA复制过程，总结DNA复制的基本规律。 以E．coli为例,DNA复制过程分三个阶段；①起始：从DNA上控制复制起始的序列即起始点开始复制,形成复制叉,复制方向多为双向,也可以是单向,若以双向进行复制,两个方向的复制速度不一定相同.由于DNA聚合酶不能从无到有合成新链,所以DNA复制需要有含3’-OH的引物,引物由含有引物酶的引发体合成一段含3一10个核苷酸的RNA片段；②延长：DNA复制时,分别以两条亲代DNA链为模板,当复制叉沿DNA移动时,以亲代3’→5’链为模板时,子链的合成方向是5→3,可连续进行,以亲代5’→3’链为模板时,子链不能以3’→5’方向合成,而是先合成出许多5’→3’方向的冈崎片段,然后连接起来形成一条子链；③终止：当一个冈崎片段的3-OH与前一个冈崎片段的5’-磷酸接近时,复制停止,由DNA聚合酶I切除引物,填补空隙,连接酶连接相邻的DNA片段.DNA复制时,由DNA解旋酶(又称解链酶)通过水解ATP获得能量来解开DNA双链,并沿复制叉方向移动,所产生的单链很快被单链结合蛋白所覆盖,防止DNA的变性并保护其单链不被降解,复制叉前进过程中,双螺旋产生的应力在拓扑异构酶的作用下得到调整.DNA复制基本规律：①复制过程为半保留方式；②原核生物单点起始,真核生物多点起始,复制方向多为双向,也有单向；③复制方式呈多样性,(直线型、Q型、滚动环型…等)；④新链合成需要引