杏鲍菇麦角硫因生物合成基因挖掘及在酵母中的组合表达.docx
杏鲍菇麦角硫因生物合成基因挖掘及在酵母中的组合表达
目录
杏鲍菇麦角硫因生物合成基因挖掘及在酵母中的组合表达（1）．．．．3
内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1杏鲍菇麦角硫因的背景介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.2麦角硫因的生物合成及其重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.3酵母表达系统在生物合成研究中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
杏鲍菇麦角硫因生物合成基因的挖掘．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
2.1生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.2基因克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.3基因表达与活性鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
酵母中的麦角硫因生物合成基因组合表达策略．．．．．．．．．．．．．．．10
3.1酵母表达系统的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
3.2基因优化与构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
3.3表达载体设计与构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
酵母中麦角硫因生物合成基因的表达调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
4.1表达条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
4.2代谢途径分析与调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
4.3表达水平检测与评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
酵母中麦角硫因的生物合成产物分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
5.1产物提取与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
5.2产物含量与活性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
5.3产物结构表征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
结果与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
6.1麦角硫因生物合成基因的挖掘与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
6.2酵母中麦角硫因生物合成基因的表达调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
6.3酵母中麦角硫因生物合成的优化与提高．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
杏鲍菇麦角硫因生物合成基因挖掘及在酵母中的组合表达（2）．．．25
一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
二、杏鲍菇麦角硫因生物合成基因挖掘．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
杏鲍菇基因组研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
麦角硫因生物合成途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
基因挖掘方法与策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
挖掘结果及基因功能分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
三、酵母表达系统的选择及构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
酵母表达系统的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
表达载体的选择及构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
转化酵母细胞的方法及条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
四、组合表达研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
组合表达策略设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
表达水平检测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
组合表达对酵母细胞生长的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
五、麦角硫因的生物活性及在酵母中的表达调控．．．．．．．．．．．．．．．．39
麦角硫因的生物活性概述