第三章 紫外-可见第三次课6.ppt

第五节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 1．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 2．对比吸收光谱的特征值 3．对比吸光度或吸光系数的比值： 例： （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 例：水芹烯有两种异构体，经其他方法测定其结构为A及B。其紫外光谱：α体的λmax为268 nm (εmax为2500)，β体的λmax为229 nm (εmax为900) 。试问A及B何者为α体，何者为β体？ 三、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 续前 1．吸光系数法（绝对法） 练习 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度 解： 练习 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： 练习 例： 解： 续前 2．标准曲线法 示例 芦丁含量测定 续前 3．对照法：外标一点法 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 练习 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 练习 2）吸光系数法 练习 解： 练习 解： 0.710mg/25mL 1）对照法 2 、多组分定量方法 1) 解联立方程组 { a b (270 nm) 两个基本条件: ?选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 ?选定的两个波长下待测组分的吸光度差值应足够大 2) 双波长等吸收分光光度法 △A 标准曲线 1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量 乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加 水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分 含量 2．精密称取0.0500g样品，置于250mL容量瓶中，加入 0.02mol/L HCL溶解，稀释至刻度。准确吸取2mL，稀释至 100mL。以0.02mol/L HCL为空白,在263nm处用1cm吸收池 测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分 子量为100.0，试计算263nm处 和样品的百分含量。 四、配合物组成及其稳定常数的测定 五、酸碱离解常数的测定 本章需要掌握的内容 名词解释： 红移效应、蓝移效应、生色团、助色团、标准曲线、工作曲线 填空题： 1、分子外层电子的分子轨道可以分为哪几种? 2、它可能产生哪几种类型的跃迁? 3、单色器的组件有那些？ 填图题： 1、 σ→σ* 、ｎ→σ*、ｎ→π* 和π→π*跃迁在产生的波长和摩尔吸收系数的规律？ 2、 紫外可见分光光度计的光路图及主要部件？ 3、 几种光检测器之比较？ 简答题： 1、 偏离比尔-朗伯定律的原因？ 2、 紫外可见分光光度计中常用光源的种类及其特点？ 3、 样品池如何选择？ 计算题： 1、? 吸光度与透光率的转换？ 2、 单组份或多组份样品的比尔-朗伯定律的计算？ 3、化合物的λmax计算 问答题： 1、紫外可见分析中仪器条件如何选择？ 第三章 紫外－可见分光光度法 第四节 分析条件的选择 一、仪器测量条件的选择 任何光度计都有一定的测量误差，这是由于光源不稳定、实验条件的偶然变动、读数不准确等因素造成的。这些因素对于试样的测定结果影响较大，特别时当试样