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家兔CD147基因的克隆与原核表达的开题报告

1.研究背景

CD147（ClusterofDifferentiation147），也称为basigin、EMMPRIN（extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer）等，是一种跨膜蛋白，广泛分布于多种哺乳动物细胞表面。CD147通过与其配体结合来调控细胞间相互作用、调节免疫及炎症反应、介导肿瘤进程等生物学过程。近年来研究表明，CD147在家兔免疫系统中也发挥着重要的作用。

家兔是重要的养殖动物之一，其肉、毛、皮、胆汁等都有很高的经济价值。同时，在兔病毒研究方面，家兔也是经常被采用的模型动物。因此，研究家兔CD147的基因结构和功能，有助于深入了解家兔免疫和生殖系统的生物学过程以及其相关疾病的发生机制，具有重要的理论和实际意义。

2.研究目的

本研究旨在克隆家兔CD147基因的cDNA序列，并构建原核表达载体，实现在大肠杆菌中目标蛋白的大规模高效表达，为后续分析家兔CD147的生物学功能奠定基础。

3.研究方法

（1）提取家兔组织总RNA，通过RT-PCR扩增CD147基因的cDNA片段。

（2）将所得的cDNA片段进行测序和分析，设计引物并扩增CD147基因的全长cDNA。

（3）构建原核表达载体，将CD147基因的全长cDNA插入到表达载体上，并获得重组质粒。

（4）将质粒转化到大肠杆菌中，进行蛋白表达和纯化。

（5）对重组CD147蛋白进行SDS和Westernblot分析，验证其表达和纯度。

（6）对重组CD147蛋白进行体外相关生物学功能实验，例如与配体的结合实验。

4.预期结果

本研究预期能够克隆家兔CD147基因的全长cDNA序列，并从大肠杆菌中获得大量重组CD147蛋白。通过相关实验检测和分析，可以了解家兔CD147蛋白的生物学特性和功能，奠定后续研究的基础。