糖化蛋的白检测.ppt

糖化血红蛋白 一.糖化血红蛋白的简介 1.定义：糖化血红蛋白为血红蛋白两条β链N端的颉氨酸与葡萄糖化合而成。 2.主要来源： 成人血红蛋白通常有HbA(97%)、HbA2(2.5%)、HbF(0.5%) HbA的糖基化分类： 糖化HbA % 6 3.糖化血红蛋白的影响因素： 主要与血红蛋白和红细胞寿命时段内血糖平均 度有关 红细胞的寿命为120天，其半寿期为35天，测定的糖化血红蛋白，反应6~8周平均血糖 降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性 低血糖症等。 增高：可以了解糖尿病人在2—3个月的血糖控制情况不佳。此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高 糖化血红蛋白的检测 二.糖化血红蛋白的检测 1.标本要求 采集静脉血，用EDTA、草酸盐和氟化物抗凝 肝素抗凝标本需要在2天内完成测定，且不适 用于某些方法的检测，故不推荐使用 。 全血标本可于4摄氏度储存一周，? 70摄氏度 可以保存18周以上，一般不推荐 ? 20摄氏度 保存 标本要求不能溶血和脂血 糖化血红蛋白 2.检测方法：糖化血红蛋白检测方法很多，常用的有微柱法离子交换层析、亲和层析、高压液相、免疫凝集、离子捕获法、电泳法等。 准确率最好的是高效液相层析法(HPLC) （1）阳离子交换色谱法 　　 原理：糖化导致血红蛋白分子表面阳离子丢失 在弱的阳离子交换剂中，例如Biorex70，同时伴有增加的离子浓度和（或）pH下降，糖化血红蛋白在非糖化血红蛋白前先洗脱。 糖化血红蛋白 （2）、电泳法 　　 原理：相比于非糖化血红蛋白，因糖化而变化的总电荷和糖化血红蛋白的等电点变化是琼脂糖凝胶或者pH梯度5.0～6.5的凝胶等电聚焦电泳分离的基础。 （3）、亲和层析法 　　 原理：硼酸结合顺式-羟基。商品化的m-氨基苯硼酸琼脂糖共价结合的亲和柱已可用于微柱分析检测。将血样本中的血红蛋白加到层析柱后，所有的糖化血红蛋白与硼酸结合而非糖化血红蛋白通过层析柱可被测量。在加入高浓度也包含顺式-羟基的多羟基复合物，例如山梨醇后，糖化血红蛋白与硼酸的结合被替换而从柱子上洗脱下来。 糖化血红蛋白控制标准 3.控制标准 糖化血红蛋白能够反映过去2～3个月血糖控制的平均水平，它不受偶尔一次血糖升高或降低的影响，因此对糖化血红蛋白进行测定，可以比较全面地了解过去一段时间的血糖控制水平 世界权威机构对于糖化血红蛋白有着明确的控制指标： ADA（美国糖尿病学会）建议糖化血红蛋白控制在小于7％ IDF（国际糖尿病联盟）建议糖化血红蛋白控制标准为小于6.5％。 目前我国将糖尿病患者糖化血红蛋白的控制标准定为6.5％以下。　 糖化血红蛋白与血糖的控制情况 4%～6%：血糖控制正常。 6%～7%：血糖控制比较理想。 7%～8%：血糖控制一般。 8%～9%：控制不理想，需加强血糖控制，多注意饮食结构及运动，并在医生指导下调整治疗方案。 ＞9%：血糖控制很差，是慢性并发症发生发展的危险因素，可能引发糖尿病性肾病、动脉硬化、白内障等并发症，并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。 4.糖化血红蛋白测定的临床意义： 1、是糖尿病患者血糖总体控制情况的指标 　　 2　有助于糖尿病慢性并发症的认识 　　 3　指导对血糖的调整 　　 4　对判断糖尿病的不同阶段有一定的意义 5　区别应激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的检测意义 　　 果糖胺 一、果糖胺 1.定义：果糖胺是血清葡萄糖与血清蛋白分子末端的氨基发生非酶促糖化反应，形成高分子的酮胺结构。 2.主要来源： 葡萄糖与其他蛋白（清蛋白、膜蛋白和晶状体）结合形成酮胺，而清蛋白是血清蛋白质中含量最多的组分，所以测定果糖胺主要是测定糖化清蛋白。 3.清蛋白的半寿期约20天，测定果糖胺只能反映2~3周血糖的情况 果糖胺 二、果糖胺的测定 1.标本要求 不溶血的血清标本，也可用肝素抗凝血浆。标本在2～8℃可保存一周，不推荐冰冻保存测定标本。 2.测定方法 果糖胺的测定方法有光度法、HPLC、以及单克隆抗体等 常用的是： 果糖胺 果糖胺 eneaminol 果糖胺 3.参考范围 健康成人：205～285umol/L 糖化清蛋白：191～265umol/L 4.测量的临床意义 果糖胺(FRUCT)的测定反映糖化血清蛋白水平可了解患者过去1－2周内平均血糖的水平。增高则表明为糖尿病。 晚期糖基化终末产物 一、AGE简介 1.定义 葡萄糖与