Petrifilm肠杆菌科测试片法霉菌和酵母菌测试片法课件.ppt

3M PetrifilmTM 肠杆菌科测试片法 陆苏飚 3M中国有限公司 高级技术工程师 背景 1870年以来，大肠菌群检测一直用于食品工业中卫生状况的监控 什么是肠杆菌科？ 什么是肠杆菌科？ 革兰氏阴性 无芽孢杆菌 氧化酶阴性 发酵葡萄糖产酸或产酸产气 习惯生长于肠道、土壤、水和蔬菜 在干燥环境中存活性差 对热敏感 部分对人体有致病性 为什么要检测肠杆菌科？ 食品加工中卫生状况的优良指示菌 包含多种指示菌 检测简单 大肠菌群检测的不足 大肠菌群的定义 缺乏对乳糖发酵阴性菌的检测，如沙门氏菌，志贺氏杆菌，耶尔森氏菌 检测专一性强 欧洲广泛使用 3M PetrfilmTM肠杆菌科测试片法 PetrifilmTM肠杆菌科测试片 含有改良的VRB葡萄糖培养基 肠杆菌科为红色带黄色区域，或带气泡的菌落，或带有两者的菌落 含有酸检测的pH指示剂 培养时叠放片数小于20 培养时间24 h,37?C?1?C AOAC Official Method 2003.01 PetrifilmTM 肠杆菌科测试片 PetrifilmTM 肠杆菌科测试片 计数所有红色带黄色区域，或带气泡的菌落，或带两者的菌落 食品与环境中肠杆菌科和大肠菌群检测的对比试验 样品分布 肠杆菌科和大肠杆菌检测的对比试验 肠杆菌科和大肠杆菌检测的对比试验 VRBG平板法和PEB对照试验APHA,食物样品 VRBG平板法和PEB对照试验ISO，食物样品 VRBG平板法和PEB对照试验APHA，环境样品 VRBG平板法和PEB对照试验ISO，环境样品 PCC和PEB对照试验APHA,食物样品 PCC和PEB对照试验ISO,食物样品 PCC和PEB对照试验APHA，环境样品 PCC和PEB对照试验ISO，环境样品 3M PetrifilmTM霉菌和酵母菌测试片法 3M PetrifilmTM 霉菌和酵母菌测试片法 3MTM PetrifilmTM 霉菌酵母测试片 标准培养基 抗生素抑制细菌生长 叠放片数小于20片 磷酸酶指示剂 3-5天，21-25°C AOAC官方方法 997.02 3M PetrifilmTM 霉菌酵母测试片 小型菌落 边界清晰 颜色均一 棕褐色至蓝/绿色 菌落隆起，有立体感 方格设计方便计数 计数范围15-150 3MTM PetrifilmTM 霉菌酵母测试片 大型菌落 边界模糊 中间颜色深暗 颜色不均一 计数范围15-150 谢 谢！ 霉菌判读 霉菌的计数 Microbiology Copyright 3M China Ltd. 好氧或兼性厌氧发酵型G-杆菌 氧化酶阴性 氧化酶阳性 肠杆菌科 乳糖发酵 非乳糖发酵 埃希氏菌 克雷伯氏菌 柠檬酸杆菌 等 沙门氏菌 志贺氏杆菌 耶尔森氏菌 普罗威登斯菌等 检样 25g(ml)样品＋225ml 稀释液 10倍系列稀释 选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，接种Petrifilm测试片 菌落计数 结果报告 37?1°C, 24 ?2h 判读 计数范围15-100 TNTC(多不可计） 操作时的注意点 操作时的注意点 乳制品 奶酪 原奶 干制品 香料 奶粉 乳清粉 面粉 环境 地下水 加工设备 肉类 鸡肉 鸡蛋 绞肉 速食 冷冻蔬菜 冷冻熟菜 冷冻肉汤 待测的自然污染样品： 样品 磷酸缓冲液(APHA) 蛋白胨盐缓冲液(ISO) pH=6.5-7.5 肠杆菌 大肠菌群 菌落计数 火鸡加工中的环境样品 棉签置于磷酸缓冲液(APHA) 棉签置于蛋白 胨盐缓冲液(ISO) 平板 肠杆菌 大肠菌群 菌落计数 Log VRBG Log PEB Log VRBG Log PEB Log VRBG Log PEB Log VRBG Log PEB Log PCC Log PEB Log PCC Log PEB Log PCC Log PEB Log PCC Log PEB 检样 10倍系列稀释 选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，接种Petrifilm测试片 菌落计数 结果报告 21-25°C, 3-5 天 制备样品匀液 酵母判读