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ARHI基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系的开题报告

开题报告

题目：ARHI基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系研究

研究背景：

卵巢癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在全球范围内均位居前列。ARHI（apoptosis-relatedgene,hrev）基因是一种新型肿瘤抑制基因，其编码的蛋白可以引起细胞凋亡并抑制肿瘤细胞的生长。研究发现，ARHI基因启动子的甲基化水平增高与卵巢癌的发生密切相关。

研究内容：

1.对ARHI基因启动子甲基化水平与卵巢癌患者临床特征间的关系进行分析，研究ARHI基因启动子甲基化水平与卵巢癌发生的相关性。

2.利用实时荧光定量PCR（qPCR）或荧光原位杂交（FISH）技术，比较ARHI基因启动子甲基化水平与其表达水平之间的关系，探究ARHI基因启动子甲基化对其转录表达的影响。

3.借助体外细胞实验，观察ARHI基因启动子甲基化水平的变化对卵巢癌细胞的增殖、凋亡等作用。

研究意义：

本研究可为ARHI基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系提供新的证据，有助于深入了解其分子机制，为卵巢癌的早期诊断和治疗提供理论基础和新思路。同时，研究成果还有望为其他类型癌症的研究提供借鉴和参考。

研究方法：

1.收集卵巢癌患者与正常人群的DNA样品。

2.利用甲基化敏感限制酶AvaI和MspI对ARHI基因启动子进行限制酶切，PCR扩增得到相应的片段。

3.利用亚硫酸氢盐和硝酸钠处理DNA样品，使未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶（T/U），从而实现ARHI基因启动子甲基化水平的检测。

4.利用基因芯片或下一代测序技术，对ARHI基因启动子的甲基化水平进行高通量测定。

5.采用实时荧光定量PCR技术或荧光原位杂交技术，检测ARHI基因的mRNA表达量。

6.利用细胞凋亡检测试剂盒等技术，对促进或抑制细胞凋亡的小分子化合物进行体外筛选。

进度安排：

第一年：收集ARHI基因启动子甲基化数据，建立ARHI基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系模型。

第二年：检测ARHI基因的转录表达水平，并探究其与甲基化水平之间的关系。

第三年：利用体外实验验证甲基化水平变化对卵巢癌细胞的影响，并进行相应的机制研究。

第四年：总结分析研究结果，撰写学位论文。

参考文献：

1.YanLi,etal.ARHI(DIRAS-3),animprintedtumoursuppressorgene,bindstoimportinsandblocksnuclearimportofFAK.Oncogene.2005,24:450-461.

2.ZhangB,etal.ThedirectinteractionbetweenARHIandST14/CMTM6isinvolvedintumorigenicityofovariancancercells.Oncogene.2016,35(22):2951-2962.

3.AnshuRastogi,etal.PromoterhypermethylationinIndianprimaryoralsquamouscellcarcinoma.AsianPacJCancerPrev.2008,9:27-31.

4.LuKH,etal.HighfrequencyofBRCA1andBRCA2germlinemutationsinwomenwithovariancancerlivingintheUnitedStates.ObstetGynecol.2013,121(4):741-748.