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人结直肠癌组织中SM22α基因启动子甲基化变化及其与蛋白表达的关系的开题报告

一、研究背景与意义

结直肠癌是一种常见的肠道恶性肿瘤，严重危害人类健康。据统计，目前世界上每年约有超过100万人因结直肠癌死亡，居于各种癌症之首。SM22α是一种大分子的细胞蛋白，是平滑肌细胞特异性蛋白。SM22α的基因位于人类第11号染色体上，是一种调节肌肉收缩的关键蛋白。近年来，研究发现肿瘤细胞中SM22α表达下降，而且SM22α缺失可以促进肿瘤的恶性转化。

甲基化是一种常见的表观遗传学修饰方式，目前已经成为癌症发生和发展过程中的重要关键因素。研究发现，一些基因的启动子甲基化可以导致基因沉默，从而促进癌细胞的增殖和转移。因此，研究肠癌组织中SM22α基因启动子的甲基化状态对于深入探究结直肠癌的发生和发展机制、筛选治疗靶点具有非常重要的意义。

二、研究目的

本研究旨在探究结直肠癌组织中SM22α基因启动子甲基化变化及其与SM22α蛋白表达的关系，为进一步深入探究结直肠癌的发生和发展机制、筛选治疗靶点提供参考。

三、研究内容和方法

（一）研究内容：

1.筛选结直肠癌组织和正常对照组织；

2.提取DNA，利用甲基化特异性PCR技术分析SM22α基因启动子甲基化状态；

3.Westernblot检测SM22α蛋白表达；

4.对结果进行统计学分析，探索SM22α基因启动子甲基化与SM22α蛋白表达之间的关系。

（二）研究方法：

1.采集超声引导下的结直肠癌组织和癌旁正常对照组织；

2.使用琼脂糖凝胶电泳法分离DNA，然后利用碱性苛性处理、NaOH析取和乙醇沉淀等技术提取DNA；

3.利用BisulfiteConversionKit将DNA进行硫酸盐处理，转化为亚硫酸盐处理的可甲基化DNA；

4.对DNA进行PCR扩增，PCR扩增产物检测采用限制酶切和聚合酶链反应技术；

5.样品蛋白提取，Westernblot进行SM22α蛋白表达分析。

6.对结果进行统计学处理和分析。

四、研究预期结果与意义

通过本次结直肠癌组织中SM22α基因启动子甲基化变化及其与SM22α蛋白表达的关系的研究，我们可以了解SM22α基因在结直肠癌组织中的活性状态，深入探究甲基化修饰与结直肠癌的关系，希望能为临床治疗提供参考，为肠道肿瘤的早期筛查和精准治疗提供理论支持。