生命的物质基础、结构基础、细胞和细胞工程.ppt

　　4．细胞全能性的实现 　　(1)在生物体内，细胞没有表现出全能性的原因是基因的选择性表达。 　　(2)实现细胞全能性的条件是：①离体；②给予一定的营养物质、激素和其他外界条件。 　　5．愈伤组织的产生及特点 　　(1)愈伤组织是离体细胞经脱分化产生的，在这一过程中，当细胞分裂素和生长素共同使用时，能强烈刺激愈伤组织的形成。 　　(2)愈伤组织的特点是排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞。 　　6．植物组织培养的应用 　　(1)快速繁殖、培育无病毒植株。 　　(2)通过大规模细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂，如从紫草愈伤组织中提取紫草素。 　　(3)制造人工种子。 　　(4)此外，转基因植物的培育也用到植物组织培养。 　　7．细胞工程所用酶类 　　植物体细胞杂交用到纤维素酶和果胶酶，动物细胞培养中用到胰蛋白酶。 　　8．细胞融合 　　细胞融合的原理是细胞膜的流动性。原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法，动物细胞融合中还可用到灭活的病毒。 　　9．动物细胞培养 　　(1)培养液中通常含葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 　　(2)动物细胞培养的原理是细胞增殖。 　　(3)动物细胞培养的用途：①生产有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②器官克隆，如培养烧伤病人自身皮肤细胞；③检测有毒物质。 　　10．单克隆抗体的制备及特点 　　(1)过程：首先用已免疫的单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再在特定的选择培养基中筛选出杂交瘤细胞，培养杂交瘤细胞，再筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞，在体外培养或注入小鼠体内培养，提取大量单克隆抗体。 　　(2)优点：与常规抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。 要点归纳 　　一、植物组织培养和动物细胞培养比较 　　1．植物组织培养 　　(1)取材：较幼嫩的细胞、组织、器官。 　　(2)培养过程 　　 　　2．动物细胞培养 　　 　　3．两者比较 　　【特别提醒】根据植物组织培养的目的不同，培养阶段不同：若培育人工种子，则培养到胚状体阶段；若提取细胞产品，则一般培养到愈伤组织阶段；若培养新个体，则应培养到试管苗阶段。 植物组织培养 动物细胞培养 不 同 点 理论基础 细胞的全能性 细胞增殖 培养基 固体或半固体培养基，包括矿质无素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物 液体培养基，包括葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 结果 获得新个体或细胞产品 大量产生细胞或细胞产物 用途 ①快速繁殖、培育无病毒植物、转基因植物 ②大规模生产细胞产品：如药物、食品添加剂、香料、色素等 ①生产蛋白质制品：如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等 ②检测有毒物质 ③研究药理病理 ④移植治疗 相同点 ①都需在人工无菌的条件下操作 ②都是合成培养基 ③都需适宜的温度、pH等条件 　　二、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 植物体细胞杂交 动物细胞融合 (单克隆抗体制备) 理论基础 (原理) 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前 处理 酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶) 注射特定抗原免疫处理正常小鼠 促融 ①物理法：离心、振动、电刺激等 ②化学法：聚乙二醇(PEG) ①物、化法：与植物细胞融合相同 ②生物法：灭活的仙台病毒 过 程 第 一 步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠免疫处理 第 二 步 原生质体融合(物、化法) 动物细胞融合(物、化、生)法 第 三 步 杂种细胞的筛选与培养 杂交瘤细胞筛选与培养 第 四 步 杂种植株诱导与鉴定 单克隆抗体的提纯 植物体细胞杂交 动物细胞融合 (单克隆抗体制备) 意义和用途 ①克服远源杂交不亲合的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围 ②克服有性杂交的母系遗传，获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传 a．肿瘤定位诊断，放射性抗体→肿瘤 b．生物导弹治疗，抗体—抗癌药物→肿瘤 　　三、植物组织培养、无土栽培、动物细胞培养、微生物培养的培养基的比较 微生物 培养 植物 动物细胞培养 组织培养 无土栽培 培养的 外界条件 无菌、适宜的温度等 无菌、适宜的温度等 一定的光照、CO2、适宜的温度等 无菌、适宜的温度等 培养的 具体对象 微生物个体 离体的植物细胞、组织或器官 完整的植物个体 取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，杂种细胞 培养基成分 水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 水、无机盐、有机营养物质(如蔗糖、氨基酸等)、维生素、植物激素(细胞分裂素、生长素等) 水、无机盐 水、无机盐、有机营养物质(如葡萄糖、氨基酸等)、维生素、动物血清等 培养基类型 固体、半固体或液体 固体 液体 液体