常见性病实验室检测技术_培训课件.ppt

抗原检测 1、原理：将HSV特异性单克隆抗体包被在酶标板微孔壁上，捕获标本中的HSV抗原，形成抗原抗体复合物，继而与酶标记的二抗结合，通过酶联显色反应检测HSV。 2、方法：ELISA为目前临床上HSV抗原检测的常用方法之一 抗原检测临床意义 生殖器疱疹感染的临床表现变化多样，临床诊断的准确性不足50%～70%，通过实验室检测手段可确证HSV感染 抗体检测 原理：将HSV特异性抗原包被在酶标板微孔底上，捕获标本中的HSV抗体，形成抗原抗体复合物，通过酶联显色反应检测HSV抗体。 方法：有检测IgG 和IgM 两种ELISA方法 抗体检测临床意义 检测抗HSV抗体的血清学试验可用于证实既往HSV感染、回顾性诊断原发性感染，对恢复期或复发性生殖器疱疹的诊断意义不大。 HSV型特异性血清学抗体检测是发现亚临床无症状生殖器HSV感染者的手段之一。 细菌性阴道病 加特纳菌是健康妇女阴道中寄生的一种定殖菌。细菌性阴道病主要是由阴道加特细菌性阴道病是因阴道内加特纳菌、厌氧菌等增多，而乳酸杆菌减少，阴道内生态平衡系统改变而引起的炎症性疾病，可通过性生活传播。 实验室检查 ①分泌物pH＞4.5 ； ②分泌物加10％氢氧化钾出现胺味； ③阳性实验室化验结果(革兰染色检测分泌物细菌，或湿片查线索细胞)。 ④ 均匀一致的阴道分泌物； 符合以上标准中任何三项(但最后一项是必需的)即可诊断。 实验室检查 线索细胞检查 取分泌物作生理盐水湿片，可见散在的上皮细胞及其间的细菌，上皮细胞多于白细胞，其表面有很多细菌，使其边缘呈锯齿状而不清晰，形成所谓线索细胞(clue cell)，如20％以上的上皮细胞有此表现，可作为诊断此病的指标。加0.1％美蓝盐水作湿片，细菌染成深蓝色，易与乳酸杆菌区别。 实验室检查 实验室检查 唾液酸酶测定法 原理：唾液酸酶是BV致病因子之一，BV妇女阴道分泌物中的唾液酸酶活性明显高于正常妇女。通过检测阴道分泌物中唾液酸酶的含量，判断是否患BV. 检测试剂中主要含有细菌唾液酸酶特异性显色底物溶液。当试剂与样品中的唾液酸酶接触时，底物被水解，产生唾液酸和发色基团，发色基团进一步被空气中的O2氧化变成蓝色。 实验室检查 结果判断： 测试管和拭子头变蓝即为阳性，无颜色变化即为阴性。 实验操作方法： 将采样拭子浸入BV测试管的溶液中，轻轻搅动混匀，置35℃-37℃中温育20分钟。取出测试管，直接观察溶液和拭子头的颜色变化。 Thanks！ * 标本的采集 取材部位依据 年龄 性别 性接触方式 临床表现 取材拭子种类 藻酸钙拭子 普通棉拭子 涤纶拭子 取材部位 男性 异性恋者:采集尿道标本，有口淫史者加取咽部标本； 同性恋者: 采集尿道、直肠及咽部标本. 女性 采集宫颈标本，必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材. 幼女 幼女和/或处女膜未破的感染者标本：采集阴道分泌物 新生儿眼炎患者 采集眼结膜分泌物 取材方法 尿道 男性患者 用手指从阴茎根部向尿道口方向挤压，有症状患者可挤出脓液，用取样拭子蘸取脓液作涂片或培养。对挤压后无明显分泌物时，采用男用取材拭子插入尿道 2～3cm，稍用力转动，保留数秒钟再取出， 以采集到粘膜上皮细胞。 女性患者 可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道口，挤压出分泌物。如果无明显分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。 取材方法 宫颈 避免使用防腐剂和润滑剂，因为这些物质对淋球菌有抑制作用。仔细检查阴道壁和宫颈，如果宫颈口外面的分泌物较多，先用无菌棉拭清除过多的宫颈粘液。将一取样拭子插入宫颈管内1～2cm，稍用力转动，保留10～30秒后取出。 眼部 用男性采样拭子在眼结膜处蘸取分泌物或轻绕眼结膜。 直肠 将取样拭子插入肛门2～3cm，从紧靠肛环边的隐窝中取材。避免接触粪便。 阴道 青春期前女孩可采集阴道标本。将取样拭子置于阴道后穹窿10～15秒，采集阴道分泌物。 咽部 从咽后壁或扁桃体隐窝取材 常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌 直接显微镜检查 原理：男性淋菌性尿道炎患者常有大量黄白色脓性分泌物，其多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。 方法：革兰染色为一传统方法，革兰染色将菌分为二大类，即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。 直接显微镜检查的临床意义 男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和