T_GDFS 54-2024 木荷无性系组培育苗技术规程.docx
ICS65.020.40CCSB61
GDFS
广东省林学会团体标准
T/GDFS54—2024
木荷无性系组培育苗技术规程
CodeofpracticeonthetissuecultureofexcellentclonesofSchimasuperba
2024-12-31发布2024-12-31实施
广东省林学会发布
T/GDFS54—2024
I
目次
前言 II
1范围 1
2规范性引用文件 1
3术语和定义 1
4培养基 1
5外植体 1
6瓶苗培养 2
7瓶苗移植 2
8苗期管理 2
9苗木出圃 3
10建档 3
T/GDFS54—2024
II
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由广东省林学会团体标准化技术委员会提出并归口。
本文件起草单位：广东省林业科学研究院、信宜市林业科学研究所、英德市林业科学研究所、广东森霖造绿有限公司。
本文件主要起草人：尧俊、谢佩吾、钟泳林、刘晚传、何波祥、许金文、姜小璐、范航、黄建雄、宁华珙、张谦、连辉明、汪迎利、蔡燕灵。
T/GDFS54—2024
1
木荷无性系组培育苗技术规程
1范围
本文件规定了木荷（Schimasuperba）无性系组培育苗的培养基、外植体、瓶苗培养、瓶苗移植、苗期管理、苗木出圃和建档等技术要求。
本文件适用于木荷无性系的组培育苗。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
203722892290LY/TLY/T
2037
2289
2290
木荷培育技术规程
林木种苗生产经营档案林木种苗标签
DB44/T245主要阔叶树种苗木质量分级
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4培养基
4,1诱导培养基
1/2MS培养基+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶7g/L，pH值5.6～6.0。4.2增殖培养基
增殖A：GD培养基+6-BA1.0mg/L+IAA0.3mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶10g/L；增殖B：1/2DCR培养基+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶7g/L。pH值5.6～6.0。
4.3生根培养基
WPM培养基+IBA1.0mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶7g/L，pH值5.6～6.0。
5外植体
5.1采集
选取健壮、无病虫害并经鉴评的优良单株作为采穗母株，在连续3d晴好天气后，采集带芽嫩枝作为外植体材料。
5.2消毒
将外植体上的叶片修剪后，用清水冲洗5min，再放入超声波清洗仪中用清水清洗5min，然后置于浓度为1g/L的200mL升汞溶液中浸泡，加入2滴（约0.1mL）吐温-80，轻微摇动，消毒3min～5min后，用无菌水冲洗6次。
5.3接种
将消毒后的外植体切割成1.0cm～2.0cm的茎段，每个茎段上保留顶芽或1个～2个腋芽，斜插于诱导培养基中，每个培养瓶接种1个茎段。
T/GDFS54—2024
2
6瓶苗培养
6.1诱导
外植体接种7d～10d顶芽和腋芽萌发后，再经25d～30d转接到增殖培养基。6.2增殖
将诱导形成的愈伤组织或丛生芽，使用增殖A培养基进行继代培养，连续继代4次～6次后，如出现叶片边缘卷曲、颜色变淡等玻璃化症状，更换增殖B培养基进行继代培养；使用增殖B培养基进行多次继代后，如出现芽苗节间缩短、增殖率下降等现象，停止使用增殖B培养基，更换为增殖A培养基进行增殖培养，转换次数不超过4次。每代培养21d～28d，增殖A和增殖B培养基交替使用。
6.3生根
将培养瓶中生长健壮、苗高超过2cm的芽苗转入生根培养基中，30d后芽苗基部开始生根，形成完整植株。
6.4培养条件
培养温度为26。C～28。C，光照度为2000Lx～3000Lx，光照时间8h/d～12h/d。
7瓶苗移植
7.1炼苗
生根培养约35d～40d后，待苗高生长