细胞破碎-分离纯化.ppt

生物分离工程精品课程 主讲：曹学君 细胞破碎 概述 生物分离过程的一般流程 概述 概 述 概述 概 述 概述 几种由大肠杆菌表达的胞内重组药物 概述 概 述 概述 概 述 概述 真 核 细 胞 概述 organelle细胞器 概述 细胞膜的结构 概述 细胞破碎 概述 细胞破碎 概述 细胞破碎 概述 破碎细菌的主要阻力 概述 酵母细胞壁的结构示意图 概述 破碎酵母细胞壁的阻力 概述 红面包霉菌(Neurospora crassa)的细胞壁 结构示意图 概述 细胞破碎 概述 15.1.2 植物细胞壁的化学组成和结构 概述 细胞破碎 概述 植物细胞初生壁的化学组成 “经纬”模型 概述 概述 次生细胞壁 概述 15.2 细胞破碎技术 细胞破碎技术 机械法 细胞破碎技术 非机械法破碎方法 细胞破碎技术 高压匀浆器（High pressure homogenizer） 细胞破碎技术 操作原理 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 高压匀浆法适用的范围 细胞破碎技术 高压匀浆法使用时注意事项 细胞破碎技术 高压匀浆器的种类 细胞破碎技术 细胞破碎分率关系式 细胞破碎技术 影响破碎的主要因素 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 高压匀浆器破碎细胞 细胞破碎技术 Ｄyno珠磨机 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 高速珠磨机工作原理 细胞破碎技术 Netzsch LM-20型珠磨机 细胞破碎技术 德国Netzsch公司生产的LM-20型珠磨机 细胞破碎技术 破碎作用方程 细胞破碎技术 超声波破碎 细胞破碎技术 超声波破碎的机理 细胞破碎技术 超声波破碎的适用范围 细胞破碎技术 15.2.2 非机械法 细胞破碎技术 酶解（酶溶法 Enymatic lysis) 细胞破碎技术 酶解法的优点 细胞破碎技术 自溶作用 细胞破碎技术 渗透压冲击法 细胞破碎技术 冻结-融化法 细胞破碎技术 干燥法 细胞破碎技术 化学法 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 目标产物的选择性释放 细胞破碎技术 选择性释放目标产物 细胞破碎技术 选择性释放目标产物的一般原则 细胞破碎技术 包含体的分离和蛋白质复性 细胞破碎技术 细胞破碎 细胞破碎技术 15.4.2 目标蛋白的复性 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（一） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（二） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（三） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 包含体产物分离工艺（牛生长激素分离提取） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 思考题 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 细胞破碎方法分类 目标蛋白的复性 包含体的分离和蛋白质复性 目标蛋白的复性 基因工程包涵体的纯化方法 目标蛋白的复性 外源蛋白在大肠杆菌中的积累 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 目标蛋白的复性 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（一） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（二） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 几种常见的工艺路线（三） 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 细胞破碎 目标蛋白的复性 思考题 目标蛋白的复性 沉淀法 概论 生物分离过程的一般流程 概论 16.1 概述 概论 概述 概论 概述 概论 概述 概论 沉淀法的分类 概论 16.2 蛋白质的溶解特性 蛋白质的溶解特性 蛋白质的溶解特性 蛋白质的溶解特性 蛋白质分子表面的憎水区域和荷电区域 蛋白质的溶解特性 防止蛋白质凝聚沉淀的屏障 蛋白质的溶解特性 16.3 蛋白质胶体溶液的稳定性 蛋白质胶体溶液的稳定性 蛋白质/胶体颗粒的凝聚和絮凝现象相似 蛋白质胶体溶液的稳定性 沉淀法 蛋白质胶体溶液的稳定性 沉淀法 蛋白质胶体溶液的稳定性 吸引力 蛋白质胶体溶液的稳定性 沉淀法 蛋白质胶体溶液的稳定性 DLVO理论 蛋白质胶体溶液的稳定性 16.4 蛋白质盐析 蛋白质盐析 中性盐盐析法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 Cohn方程式 蛋白质盐析 Cohnx 经验式（用浓度代替离子强度） 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 用盐析法分离蛋白质的二种方法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 盐析操作 蛋白质盐析 盐析操作(加盐方式） 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 沉淀法 蛋白质盐析 典型的硫酸铵盐析过程最适饱和度是30%~55% 蛋白质盐析