顶空气相色谱法测定血液中乙醇含量的研究.docx

第1期2014年2月 No.1 Feb. 2014 现代科学仪器Modern Scientific Instruments139顶空气相色谱法测定血液中乙醇含量的研究唐洁杨潇芮光伟杜军（西华大学生物工程学院 四川成都 610039）摘 要 目的：建立一种顶空进样毛细管柱气相色谱法快速测定全血中乙醇含量的方法。方法：样品在 60℃平衡 15min，取 上层气体 30μL 顶空进样，分流比为 1，以叔丁醇为内标物定量。结果：在该色谱条件下能完全分离乙醇和叔丁醇；该方法的线 性范围为 20-160mg/100mL，R=0.9979，检出限为 5mg/100mL，加标回收率为 92.5-96.3%，RSD 均小于 5%。结论：本法简便 , 准确 , 灵敏度高 , 重现性好 , 可用于血液中乙醇的含量测定。关键词 乙醇；血液；叔丁醇；内标；顶空气相色谱法中图分类号 R446.1文献标识码：ADetection of Ethanol in Whole Blood by Headspace Capillary Column Gas ChromatographyTang Jie,Yang Xiao,Rui Guangwei,Du Jun (Bioengineering School,Xihua University,Chengdu 610039,China)Abstract Objection:To establish method for detection of ethanol in whole blood by headspace sampling capillary column gas chromatography.Methods:The 30μL upper gas was injected as split ratio of 1 after samples were incubated at 60℃ for 15min,and tertiary butyl alcohol was as the internal standard of fixed quantity.Results:Under the chromatographic conditions,ethanol and tertiary butyl alcohol were completely separated;The linear range was 20-160mg/100mL,R=0.9979. The recovery rate was between 92.5% and 96.3% and RSD was less than 5.00%.Conclusion:This method is simple,accurate,sensitive and reproducible.It can be used for detection of ethanol content in whole blood.Key words Ethanol;Blood;Tertiary butyl alcohol;Internal standard;Headspace Gas Chromatography血液中乙醇浓度的高低是判定一个人清醒程度 的重要指标，也是交通事故判定中一个主要的法医 学鉴定指标。由于血液中含有各种蛋白质、脂肪和胶 状物质，比较黏稠，因此不宜采用直接气相色谱法测 定 [1-3]。顶空法作为一种新兴的样品前处理方法，由 于具有处理简单且无传统的液液萃取以及固相萃取（SPE）中共萃取物干扰的特点，在复杂受试物中挥发 性成分的检测中已得到了广泛的应用 [4-6]。本实验在 公安部行业标准（GA/T842-2009）的基础上，采用顶 空气相色谱法，通过对待检血样进行适当处理和色谱条件的摸索，从而对实验方法进行了改进。1材料与方法1.1仪器与试剂日本岛津 GC-2010 气相色谱仪，氢火焰离子化 检测 器（FID），配 以 GC-solution 软件。 成都科林 AutoHS 自动顶空进样器。无水乙醇（色谱纯）、叔 丁醇（色谱纯）、氯化钠（分析纯）购自成都市科龙化 工试剂厂。收稿日期：2013-06-16 基金资助：西华大学食品生物技术省级重点实验室开放研究基金资助项目，项目编号 SZJJ2009-005 作者简介：唐洁（1982-），女，四川省广安人，讲师，研究方向：食品理化分析技术研究140Modern Scientific InstrumentsNo.1 Feb. 2014 1.2试剂的配制乙醇标准工作液（10.00mg/mL）：精确量取乙 醇 1.27mL（比 重 0.7893）于 100mL 容量瓶中，加 重蒸水至刻度待用。叔丁醇工作液