药物分析-第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论.ppt

（四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （1）方法的基本理论 2）动量传递： 液流通过贯穿孔介质柱则用下式表示： 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 式中upore表示通过通道孔的速度，kp表示颗粒的渗透度，dm表示微小微球的直径。 （四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （1）方法的基本理论 2）动量传递： 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 式中dpore表示颗粒通道孔的直径，εp表示颗粒孔度，r表示与填充密切相关的常数。 （四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （1）方法的基本理论 2）动量传递：测定灌注性载体POROSR的εp、r及 εb分别为0.5、2及0.35，由（1）～（4）得 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 （四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （1）方法的基本理论 4）范第姆特方程式: 传统载体的填充柱根据色谱过程 的速率理论，研究了影响柱效率的各种因素，导出理论塔 板高度与流动相线速度之间关系，即范第姆特方程式： 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 （四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （1）方法的基本理论 4）范第姆特方程式: Afeyan等根据灌注色谱的过程，经必要的数学处理并代 入范第姆特方程式，导出了修正后的方程式： 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 （四）色谱分析法 2．灌注色谱法 （2）灌注色谱预填充柱 灌注色谱预填充柱根据其应用目的可分为分析型和制备型。分析型POROSR10主要类型有：高分离度的H和F系列。H系列用于BioCAD工作站系统和传统HPLC系统，F系列用于BioCAD工作站系统或中压系统如快速蛋白质液相色谱系统。制备型主要类型有：M和P系列的POROSR20。M系列用于BioCAD工作站系统或传统HPLC的分离纯化，P系列为特殊设计的用于低压、BioCAD工作站系统。 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 （四）色谱分析法 3．高效毛细管电泳法（HPCE） 是利用带电组分在毛细管中因其所带电荷和分子量的大小，即荷质比不同产生不同的迁移速度而进行分离的方法。毛细管电泳技术提供了与HPLC法完全不同的选择性，用HPLC法分离的肽图只有2～3个色谱峰（包括氨基酸色谱峰），而用HPCE法可分出六个色谱峰（包括氨基酸色谱峰），分辨率高. 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法 （四）色谱分析法 4．快原子轰击质谱法(FAB-MS)：快原子轰击(FAB)采用液体作基质(最常用的是甘油)，将供试品溶于极性、黏稠的高沸点溶剂中，然后轰击此溶液的表面。FAB适用于研究极性高的非挥发性分子。它的优点是溶液表面在轰击后不断更新，避免了固体表面在轰击后遭到破坏，离子信号可持续产生，但FAB通常没有分子离子峰，其信息来源于加成离子(MH ，MK ，MNa )。 第十二章 生化药物和基因工程药物分新概论 第三节 常用定量分析方法及其应用 一、理化分析法