白细胞介素1β预处理骨髓间充质干细胞可影响骨髓瘤细胞株干细胞基因及趋化因子受体基因的表达.doc

白细胞介素1β预处理骨髓间充质干细胞可影响骨髓瘤细胞株 干细胞基因及趋化因子受体基因的表达 吴玉姣1，费小明1，叶 炜1，汤 郁2，雷 芳1，朱 彦1(江苏大学附属医院，1血液科，2风湿科，江苏省镇江市 212001) 引用本文：吴玉姣，费小明，叶炜，汤郁，雷芳，朱彦. 白细胞介素1β预处理骨髓间充质干细胞可影响骨髓瘤细胞株干细胞基因及趋化因子受体基因的表达[J].中国组织工程研究，2017，21():54-59. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.01.010 ORCID: 0000-0002-0818-6001(吴玉姣) 文章快速阅读： 文题释义： 骨髓瘤细胞：具有无限分裂能力，胞并非高度分化细胞，因此分裂能力较强，而其它肿瘤细胞分裂能力较弱，因此多在制备单克隆抗体时与B淋巴细胞融合，使单克隆抗体迅速大量增殖。 多发性骨髓瘤患者骨髓微环境的异常：骨髓间充质干细胞作为骨髓微环境重要组成部分一员。骨髓瘤患者骨髓微环境中往往存在着白细胞介素1β白细胞介素6等炎性因子水平的异常增高，这些异常水平的炎性因子不但直接作用于骨髓瘤细胞，而且还可以间接通过间充质干细胞等微环境中其他细胞，调节骨髓瘤细胞功能。但这些细胞因子短期或长期异常对骨髓瘤细胞的影响，目前尚不清楚。 摘要 背景：既往多项研究提示多发性骨髓瘤患者间充质干细胞的细胞因子分泌、免疫调节、成骨分化等生物功能异常。 目的：观察白细胞介素1β单次或多次预处理的正常间充质干细胞后，其再与多发性骨髓瘤细胞株共培养，对骨髓瘤细胞干细胞相关基因、趋化相关受体等表达的影响。 方法：实验分为无白细胞介素1β预处理的骨髓间充质干细胞对照组、白细胞介素1β 预刺激 1 d及 白细胞介素1β预刺激 7 d 组，各组分别培养7 d后，均加入骨髓瘤细胞株H929直接接触共培养。3 d后收集各组中骨髓瘤细胞株H929细胞，分别采用 Western blot方法检测各组细胞NANOG、SOX2 和OCT-4 蛋白的表达水平，RT-PCR 方法检测各组细胞趋化因子受体CCR1、CCR2、CCR6和CXCR4的基因表达水平。 结果与结论：①与对照组比较，H929细胞株和单次白细胞介素1β处理组及多次白细胞介素1β处理组共培养后，SOX2蛋白表达水平升高P 0.05)；②与对照组、单次白细胞介素1β处理组比较，多次白细胞介素1β处理组CCR1和CCR2基因的表达水平均增高P 0.05)；③实验结果显示，正常骨髓间充质干细胞经炎症因子白细胞介素1β单次或多次刺激后，在与骨髓瘤细胞的相互作用中，对骨髓瘤细胞的干细胞基因表达、细胞趋化因子受体表达等均产生影响。这提示骨髓微环境中异常水平炎性因子，除了直接作用于骨髓瘤细胞之外，很可能通过影响间充质干细胞等非骨髓瘤细胞后，间接参与骨髓瘤疾病的发生和发展，并且其对骨髓瘤细胞的影响效果与白细胞介素1β作用间充质干细胞的时间长短有关。 多发性骨髓瘤；间质干细胞；肿瘤微环境；白细胞介素1β Interleukin-1beta regulates stem cell gene and chemokine receptor gene expression of myeloma cell lines via pretreatment on bone marrow mesenchymal stem cells Wu Yu-jiao1, Fei Xiao-ming1, Ye Wei1, Tang Yu2, Lei Fang1, Zhu Yan1 (1Department of Hematology, 2Department of Rheumatism, Affiliated Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang 212001, Jiangsu Province, China) Abstract BACKGROUND: Many studies have showed that mesenchymal stem cells derived from multiple myeloma patients display a wide range of abnormal biological features, including cytokine secretion, immune regulation and osteogenic differentiation. OBJECTIVE: To investigate the expression of stem cell-associated proteins and chemo